基于熒光標(biāo)記發(fā)夾式DNA探針的汞離子定量檢測技術(shù)的研究.pdf

1、環(huán)境污染已成為一個(gè)全球性問題，而重金屬污染在環(huán)境污染中備受關(guān)注，汞污染作為較嚴(yán)重的一種重金屬污染，對(duì)生態(tài)環(huán)境具有嚴(yán)重的危害。由于汞難被降解，能夠在土壤、水、空氣中廣泛富集，最后經(jīng)過食物鏈和大氣等進(jìn)入人體，嚴(yán)重破壞蛋白和酶的活性，造成器官中毒。為了更好的預(yù)防汞污染帶來的食品安全、疾病危機(jī)等問題，開發(fā)一種方便快捷、靈敏高效，并且能夠?qū)崿F(xiàn)現(xiàn)場檢測，用于臨床診斷的檢測手段變得越來越重要。
　　在汞離子的檢測方法中使用最廣泛的屬于常規(guī)的大型

2、儀器檢測方法，如原子吸收光譜法、ICP-MS等方法，這些方法在檢測靈敏度和精度上都非常高，但是操作比較復(fù)雜，而且耗時(shí)也相對(duì)較長。而面對(duì)日益嚴(yán)峻復(fù)雜的汞污染挑戰(zhàn)，為了實(shí)現(xiàn)對(duì)不同環(huán)境現(xiàn)場的汞污染檢測，研究人員也在不斷開發(fā)一些新型的Hg2+檢測方法。如試紙條法、化學(xué)傳感器法，納米材料傳感器法以及DNA探針法等，試紙條法是比較簡便的一種方法，但只能做定性檢測，無法實(shí)現(xiàn)定量分析，而其他檢測方法基本都是利用化學(xué)分子或一些官能團(tuán)能夠結(jié)合Hg2+，引起

3、分子結(jié)構(gòu)或者分子的發(fā)光特性的改變，最后通過觀察吸收譜或光譜來實(shí)現(xiàn)對(duì)Hg2+的定量檢測，相對(duì)傳統(tǒng)大型儀器方法，這些方法在操作和成本上具有很大改善，但在靈敏度和耗時(shí)上仍需改進(jìn)。
　　結(jié)合DNA鏈特性和熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)，在本課題中我們?cè)O(shè)計(jì)了一種發(fā)夾式的富含T堿基的DNA鏈，無需繁瑣的溫度處理，實(shí)現(xiàn)在常溫下一步法檢測Hg2+。在DNA鏈兩端分別修飾熒光染料Cy3、Cy5，通過觀察 Cy3熒光強(qiáng)度的變化，將其變化與 Hg2+濃度進(jìn)行線性