金針菇SF-07菌株多糖的提取、結構與抗氧化活性分析.pdf

1、金針菇(Flammulina velutipes(Fr.)Singer)，又名金錢菌，屬真菌門（Eumycophyta），擔子菌亞門（Basidiomycotina），層菌綱（Hymenomycetes），傘菌目(Agaricales)，口磨科（Tricholomataceae），小火焰菌屬（Flammulina）或金錢菌屬（Collybia）。金針菇口味鮮美，營養(yǎng)豐富，富含多種生物活性物質，如多糖、維生素、蛋白質、多元酚、樸菇素、膳食

2、纖維等。金針菇子實體多糖具有良好的免疫調節(jié)、抗腫瘤、抗氧化及其它生理活性，但金針菇胞內多糖(Intracellular Polysaccharides，IPS)和胞外多糖（Exopolysaccharides，EPS）的研究較少。
　　應用Plackett-Burman(PB)和Response Surface Methodology(RSM)方法優(yōu)化金針菇SF-07菌株的IPS和EPS的提取條件;對IPS和EPS進行酶水解和酸水

3、解，并進行分離純化;測定了各種多糖組分的單糖組成、分子量、鍵型和抗氧化活性。
　　(1)金針菇多糖的提取優(yōu)化
　　PB優(yōu)化試驗篩選出三個主要影響因素，進一步進行響應面試驗，在最優(yōu)條件下，IPS和EPS的理論提取率分別為5.74％和2.78mg/mL，而驗證提取率分別為5.88％和2.82mg/mL，說明試驗模型擬合，可以用于試驗結果分析。
　　(2)金針菇多糖的酶解和水解
　　IPS和EPS經酶水解后分別得到酶解

4、胞內多糖(enzymatic hydrolysis intracellularpolysaccharides，EIPS)和酶解胞外多糖（enzymatic hydrolysis exopolysaccharides，EEPS）。IPS和EPS經酸水解后分別得到酸解胞內多糖(acidic hydrolysis intracellularpolysaccharides，AIPS)和酸解胞外多糖(acidic hydrolysis exopo

5、lysaccharides，AEPS)。
　　(3)金針菇多糖的分離純化
　　通過DEAE-52纖維素柱的分離，IPS得組分IPS-1和IPS-2;EIPS得組分EIPS-1和EIPS-2;AIPS得組分AIPS-1;EPS得組分EPS-1和EPS-2;EEPS得組分EEPS-1和EEPS-2;AEPS得組分AEPS-1。
　　(4)金針菇多糖的分子量
　　高效液相色譜結果顯示，IPS和EPS的數均分子量分別為5

6、.77×104Da和4.58×103Da，其它分子量參數IPS大于EPS。
　　(5)金針菇多糖的單糖組成
　　氣相色譜測定結果顯示，金針菇多糖的單糖包括鼠李糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖，各組分的單糖組成和含量存在差異。
　　(6)金針菇多糖的鍵型
　　通過紅外光譜掃描結果顯示，IPS-2、EPS-1和EPS-2均為呋喃型多糖，IPS-1為吡喃型多糖。
　　(7)金針菇多糖的體外抗氧化活性
　　結果表明

7、IPS及其產物擁有較強的還原力和對羥基自由基、超氧自由基、DPPH的清除能力，EIPS-2表現(xiàn)出較強的抗氧化活性;同樣EPS及其產物的抗氧化試驗表明，EEPS-2具有較強的體外抗氧化活性?；诳寡趸囼灪蛦翁墙M分結果分析，推斷金針菇的胞內和胞外多糖的抗氧化活性可能受鼠李糖的含量影響。
　　(8)金針菇多糖的體內抗氧化活性
　　結果表明，IPS和EPS均具有較強的體內抗氧化活性，主要表現(xiàn)在能顯著降低小鼠體內MDA含量，明顯提高