金針菇SF-07菌株多糖的提取、結(jié)構(gòu)與抗氧化活性分析.pdf

1、金針菇(Flammulina velutipes(Fr.)Singer)，又名金錢菌，屬真菌門（Eumycophyta），擔(dān)子菌亞門（Basidiomycotina），層菌綱（Hymenomycetes），傘菌目(Agaricales)，口磨科（Tricholomataceae），小火焰菌屬（Flammulina）或金錢菌屬（Collybia）。金針菇口味鮮美，營養(yǎng)豐富，富含多種生物活性物質(zhì)，如多糖、維生素、蛋白質(zhì)、多元酚、樸菇素、膳食

2、纖維等。金針菇子實體多糖具有良好的免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗氧化及其它生理活性，但金針菇胞內(nèi)多糖(Intracellular Polysaccharides，IPS)和胞外多糖（Exopolysaccharides，EPS）的研究較少。
　　應(yīng)用Plackett-Burman(PB)和Response Surface Methodology(RSM)方法優(yōu)化金針菇SF-07菌株的IPS和EPS的提取條件;對IPS和EPS進(jìn)行酶水解和酸水

3、解，并進(jìn)行分離純化;測定了各種多糖組分的單糖組成、分子量、鍵型和抗氧化活性。
　　(1)金針菇多糖的提取優(yōu)化
　　PB優(yōu)化試驗篩選出三個主要影響因素，進(jìn)一步進(jìn)行響應(yīng)面試驗，在最優(yōu)條件下，IPS和EPS的理論提取率分別為5.74％和2.78mg/mL，而驗證提取率分別為5.88％和2.82mg/mL，說明試驗?zāi)Ｐ蛿M合，可以用于試驗結(jié)果分析。
　　(2)金針菇多糖的酶解和水解
　　IPS和EPS經(jīng)酶水解后分別得到酶解

4、胞內(nèi)多糖(enzymatic hydrolysis intracellularpolysaccharides，EIPS)和酶解胞外多糖（enzymatic hydrolysis exopolysaccharides，EEPS）。IPS和EPS經(jīng)酸水解后分別得到酸解胞內(nèi)多糖(acidic hydrolysis intracellularpolysaccharides，AIPS)和酸解胞外多糖(acidic hydrolysis exopo

5、lysaccharides，AEPS)。
　　(3)金針菇多糖的分離純化
　　通過DEAE-52纖維素柱的分離，IPS得組分IPS-1和IPS-2;EIPS得組分EIPS-1和EIPS-2;AIPS得組分AIPS-1;EPS得組分EPS-1和EPS-2;EEPS得組分EEPS-1和EEPS-2;AEPS得組分AEPS-1。
　　(4)金針菇多糖的分子量
　　高效液相色譜結(jié)果顯示，IPS和EPS的數(shù)均分子量分別為5

6、.77×104Da和4.58×103Da，其它分子量參數(shù)IPS大于EPS。
　　(5)金針菇多糖的單糖組成
　　氣相色譜測定結(jié)果顯示，金針菇多糖的單糖包括鼠李糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖，各組分的單糖組成和含量存在差異。
　　(6)金針菇多糖的鍵型
　　通過紅外光譜掃描結(jié)果顯示，IPS-2、EPS-1和EPS-2均為呋喃型多糖，IPS-1為吡喃型多糖。
　　(7)金針菇多糖的體外抗氧化活性
　　結(jié)果表明

7、IPS及其產(chǎn)物擁有較強的還原力和對羥基自由基、超氧自由基、DPPH的清除能力，EIPS-2表現(xiàn)出較強的抗氧化活性;同樣EPS及其產(chǎn)物的抗氧化試驗表明，EEPS-2具有較強的體外抗氧化活性?；诳寡趸囼灪蛦翁墙M分結(jié)果分析，推斷金針菇的胞內(nèi)和胞外多糖的抗氧化活性可能受鼠李糖的含量影響。
　　(8)金針菇多糖的體內(nèi)抗氧化活性
　　結(jié)果表明，IPS和EPS均具有較強的體內(nèi)抗氧化活性，主要表現(xiàn)在能顯著降低小鼠體內(nèi)MDA含量，明顯提高