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文檔簡介
1、蛹蟲草[Cordyceps militaris(L.EXFr)Link],又名北冬蟲夏草、蛹草、北蟲草、蛹草菌等,分類學(xué)上屬于子囊菌亞門(Ascomycotina)、核菌綱(Pyrenomycetes)、球殼菌目(Sphaeriales)、麥角菌科(Claviciptiaceae)、蟲草屬(Cordyceps)。富含多種生物活性物質(zhì),蛹蟲草多糖在抗氧化、增強(qiáng)免疫力等方面有重要作用,是一種名貴的食藥用真菌。
紫外線孢子誘變技
2、術(shù)是一種行之有效的育種方法,至今仍廣泛應(yīng)用。真菌多糖在國際上被稱為“生物反應(yīng)調(diào)節(jié)物”,由于其獨特的生理活性,目前正成為國內(nèi)外眾多學(xué)科領(lǐng)域研究的熱點之一。
蛹蟲草多糖不僅存在于子實體中,經(jīng)發(fā)酵獲得的菌絲體和發(fā)酵液也是多糖的主要來源之一。經(jīng)液態(tài)深層發(fā)酵培養(yǎng)獲得的蛹蟲草菌絲體和發(fā)酵液,其營養(yǎng)價值和有效成分與子實體相當(dāng),并且液態(tài)深層發(fā)酵法具有生產(chǎn)周期短、生長條件易控制、產(chǎn)量高等優(yōu)點,相對傳統(tǒng)方法而言更易實現(xiàn)大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化、周年化生產(chǎn)
3、。
蛹蟲草多糖的藥用價值及其應(yīng)用已為世界各國重視。近年來,國內(nèi)的研究重點已經(jīng)由蛹蟲草的栽培及菌種的馴化轉(zhuǎn)移到蛹蟲草多糖的提取及活性功能等方面。
本課題采用蛹蟲草孢子懸液紫外誘變的方法選育出了高產(chǎn)多糖且遺傳穩(wěn)定的誘變菌株SU5-8,初步確定了最適紫外線照射時間為120s。
利用Plackett-burman(PB)實驗和響應(yīng)面法(response surface methodology,RSM)優(yōu)
4、化了SU5-8胞內(nèi)多糖(intracellular polysaccharide,IPS)和胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)的分離提取條件。胞內(nèi)多糖提取最佳條件是超聲波處理次數(shù)60、超聲波功率545W、乙醇倍數(shù)3.3、提取溫度80℃,在此優(yōu)化條件下,多糖得率達(dá)9.23%;胞外多糖優(yōu)化條件是pH7.4、乙醇濃度95%、乙醇倍數(shù)3.5,在此優(yōu)化條件下,多糖得率達(dá)2.91μg/mL。
以二苯基苦基苯肼自由基
5、(DPPH)、超氧陰離子自由基(O2-·)、羥基自由基(·OH)和總還原力為指標(biāo),對蛹蟲草多糖體外抗氧化能力進(jìn)行了初步探討。結(jié)果表明,胞內(nèi)多糖和胞外多糖對上述三種自由基都有很好的清除作用,清除率均在50%以上。在還原力方面,IPS和EPS有明顯的差別,相差在50%以上。
通過測定小鼠心、肝、脾、腎組織和全血的脂質(zhì)過氧化物含量、谷胱甘肽過氧化物酶及超氧化物歧化酶的活性,觀察了多糖對機(jī)體各組織及全血抗氧化能力的影響。結(jié)果表明,
6、EPS和IPS均能提高小鼠組織及全血超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidsade,GSH-Px)活性,并能降低丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量,提高了機(jī)體抗活性氧損傷的能力,為防止或減輕脂質(zhì)過氧化損傷提供了試驗依據(jù)。綜合來看,IPS提高SOD和GSH-Px活性與降低MDA含量的能力要高于EPS;未除蛋白的比去除蛋白的要高。
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