基于環(huán)糊精超分子主客體組裝構(gòu)建基因載體.pdf

1、基因治療的主要目的是在特定的細(xì)胞中導(dǎo)入功能性的基因，治療疾病或者修復(fù)由于基因缺陷而導(dǎo)致的功能性障礙。基因治療中最主要的問(wèn)題是構(gòu)建高轉(zhuǎn)染低毒性的基因載體，相對(duì)病毒性載體，非病毒性載體由于具有低毒性、低成本以及穩(wěn)定性高等優(yōu)點(diǎn)受到了廣泛的關(guān)注?；诃h(huán)糊精的主客體組裝在基因載體中有重要的應(yīng)用，基因載體的可剪切性會(huì)降低載體的毒性，提高轉(zhuǎn)染效率。特殊的形貌如棒狀的納米粒子可以有效促進(jìn)細(xì)胞吞噬。金納米棒由于吸收波長(zhǎng)在近紅外區(qū)域，使其有光聲成像和光熱治

2、療功能?；谝陨涎芯勘尘?，本文進(jìn)行如下課題的研究:
　　1.通過(guò)原子轉(zhuǎn)移自由基聚合法（ATRP）在PEG和環(huán)糊精自組裝形成的準(zhǔn)聚輪烷兩端聚合甲基丙烯酸N，N-二甲氨基乙酯(DMAEMA)，構(gòu)建可剪切的聚輪烷(SS-PR)。通過(guò)與二溴異丁酰溴(BIBB)反應(yīng)在SS-PR引入更多的引發(fā)位點(diǎn)，形成大分子引發(fā)劑(SS-PR-Br)，通過(guò)控制第二步ATRP的時(shí)間，構(gòu)建一系列的準(zhǔn)梳狀陽(yáng)離子聚合物(SS-PR-pDMs)。相對(duì)于SS-PR，SS

3、-PR-pDMs具有相似的毒性，更強(qiáng)的質(zhì)粒DNA(pDNA)絡(luò)合能力、更高的細(xì)胞吞噬率和轉(zhuǎn)染效率。此外SS-PR-pDMs更有利于pDNA進(jìn)入細(xì)胞核。本研究表明以可剪切聚輪烷為基體，通過(guò)兩步ATRP構(gòu)建準(zhǔn)梳狀陽(yáng)離子聚合物是一種有效的提高轉(zhuǎn)染效率的方法。
　　2.為了構(gòu)建兼具成像和熱療功能的基因載體，以棒狀纖維素(CNC)-金納米粒子（球形顆?；蚣{米棒）作為基體。首先構(gòu)建環(huán)糊精為核的陽(yáng)離子聚合物(CD-PGEA):以BIBB修飾的β

4、-環(huán)糊精為引發(fā)劑，聚合甲基丙烯酸縮水甘油酯(GMA)，并用乙醇胺(EA)功能化修飾。然后在聚乙二醇(PEG)一端引入金剛烷(Ad)，另外一端接硫辛酸(LA)，作為納米粒子與陽(yáng)離子聚合物的中間連接體(Ad-PEG-LA)。通過(guò)金硫鍵和環(huán)糊精-金剛烷自組裝將纖維素-金納米粒子與CD-PGEA組裝。與CD-PGEA相比，與納米粒子組裝后的載體吞噬率增加，轉(zhuǎn)染效率提高，連接不同形貌的金粒子（球形顆?；蚣{米棒）后轉(zhuǎn)染效率接近。連接金棒的載體還兼具