球孢白僵菌Mars發(fā)酵牛奶產(chǎn)生紫紅色物質(zhì)的初步研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)室分離到一株絲狀真菌Mars，經(jīng)鑒定Mars菌株屬于白僵菌屬中的球孢白僵菌。前期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Mars菌株在牛奶培養(yǎng)基中培養(yǎng)后，可使培養(yǎng)基中出現(xiàn)紫紅色物質(zhì)。本實(shí)驗(yàn)研究了球孢白僵菌Mars菌株形成紫紅色物質(zhì)的培養(yǎng)基以及培養(yǎng)條件，并對(duì)這種紫紅色物質(zhì)進(jìn)行了初步的分離和穩(wěn)定性研究。
　　分別用查氏固體培養(yǎng)基、馬鈴薯瓊脂葡萄糖固體培養(yǎng)基、牛乳固體培養(yǎng)基培養(yǎng)Mars菌株。28℃培養(yǎng)15d后，發(fā)現(xiàn)沒(méi)有紫紅色物質(zhì)產(chǎn)生。Mars菌株再分別于查氏液體

2、培養(yǎng)基、馬鈴薯瓊脂葡萄糖液體培養(yǎng)基、牛乳液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，28℃培養(yǎng)15d后，發(fā)現(xiàn)只有在牛乳液體培養(yǎng)基中才有紫紅色物質(zhì)產(chǎn)生。球孢白僵菌標(biāo)準(zhǔn)菌株3.4428在牛乳液體培養(yǎng)基中28℃培養(yǎng)15d后，發(fā)現(xiàn)沒(méi)有紫紅色物質(zhì)產(chǎn)生。結(jié)果表明:在本實(shí)驗(yàn)所選擇的培養(yǎng)基范圍內(nèi)，牛乳液體培養(yǎng)基是唯一的能使球孢白僵菌Mars菌株產(chǎn)生紫紅色物質(zhì)的培養(yǎng)基。
　　分別測(cè)定了球孢白僵菌Mars菌株發(fā)酵牛奶產(chǎn)生紫紅色物質(zhì)的最佳溫度和pH值。將球孢白僵菌Mars分別放

3、在18℃、23℃、28℃、33℃和38℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每隔5d觀(guān)察并記錄Mars菌株在不同溫度下的生長(zhǎng)和產(chǎn)生紫紅色物質(zhì)的情況。再用1 mol/LNaOH溶液和乳酸調(diào)節(jié)牛乳液體培養(yǎng)基pH為5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5，接種后放在28℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每隔5d觀(guān)察并記錄Mars菌株在不同pH條件下的生長(zhǎng)和產(chǎn)生紫紅色物質(zhì)的情況。結(jié)果表明:28℃為Mars菌株發(fā)酵牛奶產(chǎn)生紫紅色物質(zhì)的最佳溫度，pH在6.0-7.0的范

4、圍內(nèi)Mars菌株能夠產(chǎn)生大量的紫紅色物質(zhì)。
　　實(shí)驗(yàn)使用有機(jī)溶劑萃取法對(duì)球孢白僵菌Mars發(fā)酵牛奶產(chǎn)生的紫紅色物質(zhì)進(jìn)行了初步分離純化。將牛乳發(fā)酵液進(jìn)行離心處理后，用不同萃取劑對(duì)沉淀進(jìn)行萃取，最后用紫外分光光度計(jì)進(jìn)行掃描，結(jié)果表明:沉淀萃取液在330nm左右有吸收峰且丙酮為最佳萃取劑;上清液在500nm左右有吸收峰。
　　初步研究了Mars菌株產(chǎn)生的紫紅色物質(zhì)的穩(wěn)定性。取沉淀萃取液和上清液，分別放于25℃、40℃、60℃、80

5、℃的恒溫水浴中2h，用分光光度計(jì)在其最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。取上清液并將pH值調(diào)到2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13，放置12h，用分光光度計(jì)在其最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。取沉淀萃取液和上清液，分別放在日光燈、室內(nèi)自然光和黑暗處，每隔一定時(shí)間測(cè)定吸光度。結(jié)果表明:沉淀色素和上清色素在25℃～80℃溫度范圍內(nèi)吸光度值幾乎沒(méi)有變化，色素比較穩(wěn)定;酸性條件下上清色素較穩(wěn)定，而堿性條件下上清色素不穩(wěn)定。黑暗處和室內(nèi)自然光對(duì)