非水相體系中固定化脂肪酶催化合成L-抗壞血酸棕櫚酸酯.pdf

1、L-抗壞血酸棕櫚酸酯(L-ascorbyl palmitate，L-AP)是一種脂溶性抗氧化劑，具有良好的自由基清除、抗氧化、抗衰老、抗癌抗腫瘤等營養(yǎng)保健功能，廣泛用于含油食品、動植物油及高級化妝品中。然而，現(xiàn)有的商品化L-AP基本上都是通過化學(xué)方法合成的，存在環(huán)境污染大、副反應(yīng)多、對設(shè)備要求高等缺點(diǎn)。生物酶催化技術(shù)具有反應(yīng)條件溫和、特異性高、環(huán)境友好、催化效率高等特點(diǎn)，尤其是近年來酶固定化技術(shù)的發(fā)展，克服了游離酶穩(wěn)定性差、易變性、使用

2、成本高、重復(fù)使用性差等方面的不足，使生物酶催化技術(shù)在生物或化學(xué)合成領(lǐng)域具有更明顯的優(yōu)勢，尤其在非水相體系中有很好的應(yīng)用前景。
　　 本研究采用固定化假絲酵母脂肪酶催化合成L-AP，主要考察并優(yōu)化了固定化酶催化合成L-AP的條件，分析了產(chǎn)物L(fēng)-AP和副產(chǎn)物水對L-AP合成的影響，并探究了固定化酶催化連續(xù)合成L-AP的可行性。主要研究結(jié)果如下：
　　 (1)以疏水PTFE/無紡布復(fù)合膜為載體，利用過濾—吸附—交聯(lián)的組合固定化

3、方法制備的固定化假絲酵母脂肪酶(Candida sp.1619)具有較好的儲存穩(wěn)定性和操作穩(wěn)定性，常溫儲存380d后酶活力仍保持在初始酶活力的65％，固定化酶的使用半衰期為140～160h。
　　 (2)系統(tǒng)考察了溶劑、溫度、時間、底物摩爾比與濃度、固定化酶用量、水活度等對L-AP合成的影響。結(jié)果表明，有機(jī)溶劑采用叔戊醇(20mL)、反應(yīng)溫度55℃、反應(yīng)時間24h、底物摩爾比9∶1、底物濃度0.79 mol·L-1、固定化酶用量

4、100U，體系水活度維持在0.1～0.3時有利于L-抗壞血酸棕櫚酸酯的合成，產(chǎn)物濃度達(dá)14 g·L-1。
　　 (3)產(chǎn)物L(fēng)-AP和副產(chǎn)物水分對L-AP合成影響的研究表明，兩者對固定化酶催化合成L-AP具有較明顯的抑制作用。向體系中適時、適量加入分子篩脫水可促進(jìn)L-AP的生成。本研究中反應(yīng)8h后加入0.6g分子篩(4A)，產(chǎn)物濃度達(dá)到25.9 g·L-1，比不加分子篩時提高了約80％。
　　 (4)對固定化脂肪酶連續(xù)催化