相關(guān)譜技術(shù)在生物大分子檢測(cè)上的應(yīng)用.pdf

1、華南師范大學(xué)碩士學(xué)位論文相關(guān)譜技術(shù)在生物大分子檢測(cè)上的應(yīng)用姓名：李軍鋒申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：光學(xué)指導(dǎo)教師：邢達(dá)20050601摘要摘要相關(guān)譜技術(shù)是一種統(tǒng)計(jì)方法，它通過(guò)對(duì)時(shí)間序列的漲落信號(hào)作相關(guān)運(yùn)算(自相關(guān)和互相關(guān))，從而得到引起漲落過(guò)程的參數(shù)，例如擴(kuò)散系數(shù)，濃度，結(jié)合和分離常數(shù)等。目前應(yīng)用廣泛的兩種相關(guān)譜技術(shù)包括：光子散射相關(guān)譜技術(shù)(photonscatteringcorrelationspectroscopyPSCS)和熒光相關(guān)譜技

2、術(shù)(fluorescencecorrelationspectroscopyFCS)。參與改進(jìn)了本實(shí)驗(yàn)室自行研制的小型低強(qiáng)度激光光子散射相關(guān)譜儀。與現(xiàn)有的同類(lèi)型儀器相比，該儀器采用雙層折射率樣品匹配池，從而可以減小雜散光的干擾；采用帶梯度折射率透鏡的單模光纖接收、傳輸散射光信號(hào)提高了散射光的收集傳輸效率；用低強(qiáng)度的激光避免了對(duì)樣品的輻射損傷，同時(shí)可以使激光器和系統(tǒng)集成在一起，整個(gè)系統(tǒng)小型實(shí)用。用標(biāo)準(zhǔn)的不同粒徑的聚苯乙烯球檢驗(yàn)了自行設(shè)計(jì)的系

3、統(tǒng)，系統(tǒng)的測(cè)量范圍從幾個(gè)納米到一個(gè)微米都很精確。利用光子散射相關(guān)譜技術(shù)研究了牛血清白蛋白分子的擴(kuò)散系數(shù)在不同強(qiáng)度離子溶液中隨著蛋白分子濃度變化的規(guī)律。結(jié)果表明在低離子強(qiáng)度環(huán)境中蛋白的擴(kuò)散系數(shù)隨蛋白的濃度增加而增加，隨著離子強(qiáng)度的逐步增大，蛋自分子的擴(kuò)散系數(shù)隨其濃度的增加而減小。利用平均勢(shì)場(chǎng)理論的兩體硬球相互作用模型解釋了蛋白分子的相互作用變化規(guī)律：隨著離子強(qiáng)度的增加，離子氛厚度減小，蛋白分子間的相互作用由排斥變?yōu)槲?，蛋白開(kāi)始聚集。根據(jù)

4、擴(kuò)散系數(shù)隨蛋白濃度變化的斜率與離子濃度變化的相關(guān)性，回歸出了蛋白相互作用參數(shù)，蛋白所帶的有效電荷zP一90e、Hamaker常量=28KBT。這項(xiàng)工作說(shuō)明了光子散射相關(guān)譜技術(shù)是研究蛋白分子相互作用的一種有效技術(shù)。參與了從德國(guó)Zeiss公司進(jìn)口的熒光相關(guān)譜儀的組裝工作。與現(xiàn)有的同類(lèi)型儀器相比，該儀器采用雙通道探測(cè)，不僅可以同時(shí)進(jìn)行自相關(guān)熒光譜測(cè)量，還可以進(jìn)行熒光互相關(guān)光譜測(cè)量；該儀器裝有三個(gè)激光器光源，一個(gè)氬離子激光器和兩個(gè)氦氖激光器，可