水溶性金屬酞菁紅區(qū)光學(xué)探針在生物大分子及無(wú)機(jī)陰離子檢測(cè)中的應(yīng)用.pdf

1、金屬酞菁是一類(lèi)化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定（耐熱、耐酸、耐堿），較易合成的化合物。自Braun和Tehemiac獲得第一個(gè)酞菁化合物以來(lái)，酞菁化合物由于其特殊的物理化學(xué)和光學(xué)性質(zhì)而在化學(xué)和化工領(lǐng)域得到了廣泛研究和應(yīng)用。上世紀(jì)80年代開(kāi)始，酞菁化合物在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用也逐步得到開(kāi)發(fā)應(yīng)用。由于金屬酞菁的吸收峰和熒光發(fā)射峰都在長(zhǎng)波區(qū)段，可以避開(kāi)絕大多數(shù)天然物質(zhì)背景光的干擾，在生物化學(xué)分析中具有廣泛的應(yīng)用前景。本論文圍繞水溶性金屬酞菁作為分子探針在生物大分子

2、和無(wú)機(jī)陰離子檢測(cè)中的應(yīng)用而展開(kāi)。
　　第一章就長(zhǎng)波長(zhǎng)光學(xué)探針的應(yīng)用進(jìn)行了闡述。首先，簡(jiǎn)要介紹了光學(xué)探針的原理、長(zhǎng)波長(zhǎng)光學(xué)探針的特點(diǎn)以及長(zhǎng)波長(zhǎng)光學(xué)探針應(yīng)用于化學(xué)及生物化學(xué)領(lǐng)域的優(yōu)勢(shì);其次，對(duì)長(zhǎng)波長(zhǎng)光學(xué)探針在小分子化合物、生物大分子的檢測(cè)以及生物成像中的應(yīng)用進(jìn)行了總結(jié)，重點(diǎn)闡述了近幾年長(zhǎng)波長(zhǎng)熒光探針在生物活體成像中的應(yīng)用進(jìn)展。
　　第二章建立了快速、靈敏測(cè)定RNA酶的熒光增強(qiáng)分析法。中性介質(zhì)中，具有紅區(qū)發(fā)射特性的強(qiáng)熒光化合物陽(yáng)離

3、子鋁酞菁(Tetra(trimethyammionio) aluminumphthalocyanine，TTMAAlPc）在低濃度的RNA存在下，發(fā)生誘導(dǎo)聚集，導(dǎo)致酞菁熒光幾乎完全猝滅。締合物中的RNA在RNA酶的水解作用下發(fā)生降解，其對(duì)TTMAAlPc的誘導(dǎo)聚集行為被破壞而使TTMAAlPc被釋放，體系熒光顯著恢復(fù)。據(jù)此現(xiàn)象，以TTMAAlPc-RNA締合物作為RNA酶的新型熒光底物，建立了熒光增強(qiáng)測(cè)定RNA酶的新方法。本法用于復(fù)雜實(shí)

4、際樣品（正常成年人尿液）的測(cè)定，并與常規(guī)的分光光度法進(jìn)行比較，結(jié)果符合良好。
　　第三章基于組蛋白對(duì)核酸的非特異性結(jié)合作用和對(duì)四磺基鋁酞菁的高效熒光猝滅作用建立了熒光增強(qiáng)測(cè)定DNA的新方法。熒光光譜行為的考察顯示，在pH8.5的Tris-HCl緩沖液介質(zhì)中，帶有正電荷的組蛋白(Histones)可幾乎完全猝滅AlS4Pc的熒光，二者形成無(wú)熒光離子締合物。在DNA的存在下，體系熒光顯著恢復(fù)，最大恢復(fù)倍數(shù)可達(dá)400倍。據(jù)此發(fā)現(xiàn)建立了D

5、NA測(cè)定新方法。AlS4Pc-Histones體系對(duì)于DNA的響應(yīng)是非特異性的，適用于不同種類(lèi)、來(lái)源和長(zhǎng)度的核糖核酸，具有重要的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值，這是本章的重要發(fā)現(xiàn)。
　　第四章建立了高選擇性測(cè)定水相MoO42-離子的分光光度新方法，并進(jìn)而開(kāi)發(fā)裸眼檢測(cè)MoO42-離子的新模式。
　　水溶性的四磺基酞菁鎳（Nickel4，4'，4"，4"'-Tetrasulfophthalocyanine，NiS4Pc）可與Pb2+離子形成難溶性

6、的復(fù)合物，而多種酸根離子可溶解該復(fù)合物，在低濃度苯磺酸的存在下，絕大多數(shù)陰離子對(duì)沉淀的溶解作用被完全或顯著抑制，只有MoO42-離子仍能溶解NiS4Pc-Pb(Ⅱ)沉淀復(fù)合物而釋放出NiS4Pc，溶液相顯示NiS4Pc的特征顏色和吸收，基于此現(xiàn)象，我們將NiS4Pc-Pb(Ⅱ)作為MoO42-的特異性識(shí)別探針，并建立了MoO42-定量分析新方法。本法特異性強(qiáng)，穩(wěn)定性極佳，操作簡(jiǎn)便快速，并可實(shí)現(xiàn)目視化觀測(cè)，這對(duì)于現(xiàn)場(chǎng)或野外分析尤有價(jià)值。<

7、br>　　第五章建立了特異性測(cè)定水相P3O105-離子的分光光度新方法，同時(shí)開(kāi)發(fā)裸眼檢測(cè)P3O105-離子的新模式。
　　水溶性的NiS4Pc與Pb2+離子形成難溶性的復(fù)合物，在低濃度檸檬酸的存在下，絕大多數(shù)陰離子對(duì)NiS4Pc-Pb(Ⅱ)沉淀復(fù)合物的溶解作用幾乎被完全抑制，只有P3O105-離子仍能溶解NiS4Pc-Pb(Ⅱ)沉淀復(fù)合物而釋放出NiS4Pc，溶液相顯示NiS4Pc的特征顏色和吸收，根據(jù)這一現(xiàn)象，我們開(kāi)發(fā)了NiS4