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文檔簡介
1、低聚果糖(fructooligosacchrides,F(xiàn)OS)是由蔗果三糖(GF2)、蔗果四糖(GF3)、蔗果五糖(GF4)和蔗果六糖(GF5)等組分組成的混合物,低聚果糖具有促進人體和動物腸道雙歧桿菌生長等生理功能,是一種公認的功能性低聚糖,廣泛地應(yīng)用于保健食品和飼料添加劑行業(yè)。
在低聚果糖的HPLC分析中需要其單組分的標準品進行定性和定量,這種標準品目前只能從國外進口,價格昂貴,國內(nèi)FOS生產(chǎn)企業(yè)無法使用。本論文的目的
2、就是為了解決采用HPLC--外標法測定低聚果糖含量時需要標準品的問題而立項的。
本文以聚丙烯酰胺凝膠為層析介質(zhì),以脫氣超純水為洗脫劑,研究了Bio-GelP-2柱層析分離低聚果糖混合樣品的特性,探討了層析條件對分離效果的影響。在最佳層析條件下批量制備了低聚果糖單組分,并進行了定性定量分析和結(jié)構(gòu)鑒定。
Bio-GelP-2柱層析分離低聚果糖的特性研究表明:有效分配系數(shù)的負對數(shù)-logKav與分子量呈線性關(guān)系,各
3、組分分子量是影響層析的主要因素,各組分與Bio-GelP-2之間無特異性吸附現(xiàn)象,層析過程中完全是按照相對分子量的大小進行的研究表明,采用Empower系統(tǒng)為層析平臺,最佳層析條件是:以ф1.6x100cm夾套柱為層析柱,柱溫40℃,柱床高度95cm,上樣量0.5mL(樣液濃度0.40g-mL-1),洗脫速度0.20mL.min-1,洗脫液自動收集,并分流至HPLC的蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)在線檢測,可以實現(xiàn)高純度的低聚果糖單組分的
4、層析制備。
經(jīng)高效液相色譜(HPLC)、電噴霧質(zhì)譜(ESI-MS)和核磁共振(NMR)分析所制備的低聚果糖單組分為蔗果三糖(1-Kestose)、蔗果四糖(1,1-Kestotetraose)、蔗果五糖(1,1,1-Kestopentaose),與Megazlaae(愛爾蘭)公司標準品的結(jié)構(gòu)一致,其純度分別為99.33%、99.94%和99.91%,可以作為HPLC分析的標準品使用。
本實驗所制備的低聚果糖單
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