發(fā)酵液中核黃素分離純化工藝的研究.pdf

1、本論文研究的主要內(nèi)容是：
　　 通過對核黃素性質(zhì)分析研究，提出一種直接離心提取發(fā)酵液中核黃素的方法。該方法分兩個主要操作單元：核黃素粗提和粗結(jié)晶精制。粗提單元：首先對核黃素發(fā)酵液進(jìn)行熱處理，冷卻至常溫后用HCI調(diào)節(jié)發(fā)酵液至酸性。采用離心法使菌體和核黃素結(jié)晶沉淀下來，用NaOH溶液充分溶解核黃素沉淀，然后離心使核黃素與菌體分離，最后通過氧化加熱含有大量核黃素的上清液，得到核黃素粗結(jié)晶。精制單元：用HCI酸化核黃素粗結(jié)晶一定時間，然

2、后熱處理除去粗結(jié)晶中部分蛋白等不溶物，離心得高純度核黃素結(jié)晶。
　　 在粗提單元中研究了不同提取工藝的條件優(yōu)化：通過對不同熱處理溫度研究得出在60℃下，加熱30min能極大提高核黃素的純度和收率；核黃素的溶解度受pH值影響較大，在堿性條件下溶解度較大，在酸性條件下較小。研究表明核黃素在發(fā)酵液pH=3時，能使發(fā)酵液中核黃素充分析出；通過不同離心條件研究表明離心轉(zhuǎn)速在9000r/min，離心時間10min時能達(dá)到很好的離心效果；對不

3、同濃度NaOH溶解核黃素研究得出：當(dāng)NaOH的濃度為0.4mol/L時，不僅能充分溶解發(fā)酵液中核黃素，而且還能保證核黃素不發(fā)生可逆變性；研究表明雙氧水的濃度控制在0.3％(w/v)，同時配合空氣進(jìn)行氧化能很好的提高收率：氧化溫度為80℃，氧化時間為2h能很好提高核黃素的粗收率和粗純度。
　　 精制單元通過不同條件的優(yōu)化得出：以1g核黃素粗結(jié)晶加入15ml0.2mol/L的HC1溶液，酸化4小時，然后在75℃下加熱30min能極大