熒光二氧化硅納米粒子的制備及生物檢測的應(yīng)用.pdf

1、本文應(yīng)用HR-TEM、AFM、Zeta-電位分析儀、XPS、IR、EDX、熒光光譜、紫外光譜、熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、熒光ELISA等多種表征工具分析了熒光納米粒子制備和修飾過程中的特征，優(yōu)化了熒光二氧化硅納米顆粒的制備工藝、探索了熒光二氧化硅納米顆粒在蛋白識(shí)別、細(xì)胞成像、小分子藥物標(biāo)記及肉類來源等生物檢測領(lǐng)域的應(yīng)用。
　　 通過分析微乳液的穩(wěn)定性、水與表面活性劑摩爾比(W0)、最佳染料量和反應(yīng)時(shí)間對粒子粒徑及熒光強(qiáng)度的影

2、響，優(yōu)化了熒光二氧化硅納米顆粒的制備條件。結(jié)果表明：微乳液穩(wěn)定24小時(shí)較穩(wěn)定30分鐘所得的粒子熒光強(qiáng)度大，顆粒粒徑均勻，沒有聚集現(xiàn)象；W0越大，顆粒粒徑越小，當(dāng)W0是10:1時(shí)，顆粒粒徑是50nm左右，而W0是40:1時(shí)，難以得到良好分散的納米顆粒；加入TEOS和氨水后的12小時(shí)之內(nèi)是顆粒逐漸形成的時(shí)間，期間顆粒從無到有，12小時(shí)后顆粒幾乎完全形成，粒徑基本均勻，反應(yīng)超過24小時(shí)后，顆粒沒有顯著變化；對于顆粒粒徑是50nm左右的粒子，最

3、佳顆粒濃度在1.0mg/ml，其中包裹聯(lián)吡啶釕染料的最佳量是2μmol。
　　 確定了熒光二氧化硅納米顆粒的表面氨基修飾和抗體連接的最優(yōu)條件。修飾氨基時(shí)加入氨基前驅(qū)物APTS(APTS與TEOS的用量比是1:1)的最佳時(shí)間是在加入TEOS和氨水12小時(shí)后，此時(shí)既能保持顆粒的良好表面修飾，又能維持顆粒的較小粒徑。氨基修飾后，因?yàn)榘被g氫鍵的形成以及表面電位的中性化，致使顆粒嚴(yán)重聚集，通過調(diào)整體系的pH值，可以改善顆粒的分散性，而納

4、米粒子在連接抗體后，顆粒恢復(fù)單分散性。熒光二氧化硅納米顆粒與鼠尾草酸的成功連接表明，熒光二氧化硅納米顆粒可以作為藥物代謝分析的輔助材料。
　　 比較了應(yīng)用戊二醛作交聯(lián)劑把抗體修飾在顆粒表面以及用高碘酸鈉氧化抗體然后修飾到顆粒表面的方法。結(jié)果表明，高碘酸鈉法制備的納米粒子特異性好、穩(wěn)定性強(qiáng)。首次利用氨基修飾的熒光二氧化硅納米顆粒(NH2-FSNPs)識(shí)別臍血來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)胞膜抗原蛋白CD44和胞漿蛋白黏著斑激酶(F