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1、以一株產(chǎn)α-乙酰乳酸脫羧酶(α-acetolacetatedecarboxylase,EC.4.1.1.5,簡稱ALDC)的地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)BL<,4>為出發(fā)菌株,進行誘變育種,以期獲得高產(chǎn)菌株,并通過優(yōu)化培養(yǎng)基組成、產(chǎn)酶條件和提取條件,進一步提高酶產(chǎn)量,旨在為ALDC的工業(yè)化生產(chǎn)提供一定理論依據(jù).結(jié)果表明:1.研究ALDC提取條件,確定采用超聲波破碎細胞,在頻率25KHz下每次輻射2秒,間隔2
2、秒,總輻射時間4.6秒,輸出功率500瓦,細胞濃度2﹪,破碎效果最好,產(chǎn)酶量最高.采用30﹪飽和度硫酸鉸除雜蛋白,80﹪飽和度硫酸銨提取粗酶效果較好,菌體存放時間超過10天,酶活力明顯降低.2.采用波長260nm,功率15W紫外線,輻射距離30cm左右進行誘變育種,通過誘變使新菌株酶活提高30﹪,傳代五次穩(wěn)定性良好.3. 通過對UV<,3>-BL<,4>變株ALDC的粗酶性質(zhì)研究,表明酶反應(yīng)的最適溫度為35~45℃,最適pH為5.5;4
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