急性腦梗死患者阿司匹林抵抗與血小板miRNA的相關性研究.pdf

1、研究背景：
　　腦梗死是發(fā)病率最高的一種腦血管疾病，是成年人致殘的主要原因，也是人類僅次于惡性腫瘤和心血管疾病的第三大致死原因。其發(fā)病率逐年上升，致死致殘率較高，預后差，給社會和家庭造成了沉重的負擔。腦梗死的病因眾多，發(fā)病機制非常復雜，遺傳因素和環(huán)境因素的相互作用是發(fā)病的中心環(huán)節(jié)。急性腦血栓形成時，血小板的活化、粘附和聚集是重要的病理過程，因此抗血小板聚集的藥物如阿司匹林等因?qū)δX血栓形成病變中具有肯定的治療作用而被廣泛應用于臨床。

2、但是阿司匹林抵抗(AR)的發(fā)生限制了其臨床療效，其目前的具體機制尚未明確。血小板在急性腦梗死的發(fā)生中發(fā)揮著重要作用，近來有研究發(fā)現(xiàn)微小RNA與血小板的活性密切相關。血小板中存在大量miRNA，其可通過作用于靶mRNA進而調(diào)節(jié)靶蛋白的表達，從而在機體正常生理及病理過程中發(fā)揮著重要作用。但目前尚無有關miRNA與急性腦梗死患者阿司匹林抵抗相關性的研究。
　　研究目的：
　　研究miR-126，miR-200b，miR-223以及

3、miR-495和它們已知的靶蛋白在山東地區(qū)漢族人群中的表達情況，探討急性腦梗死患者阿司匹林抵抗與血小板miRNA的相關性，并從遺傳學角度尋找阿司匹林抵抗發(fā)生的機制。
　　研究方法：
　　采用病例-對照的研究方法，選擇51例急性腦血栓形成患者作為病例組，60例非腦梗死、心肌梗死的健康體檢者作為對照組。對每位受試對象進行年齡、性別、身高、體重、血壓、體重指數(shù)等一般指標記錄與計算，記錄各個受試對象的高血壓史、高脂血癥史、冠心病史和

4、糖尿病史、吸煙史等腦血管病的危險因素。用1∶9的枸櫞酸鈉真空抗凝采血管采集參與者的清晨空腹血進行血細胞分析和空腹血糖(FBG)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)測定。采用流式細胞儀檢測miRNA的來源，經(jīng)血小板聚集實驗區(qū)分阿司匹林抵抗(AR)和非阿司匹林抵抗(NAR)，并分別采用RT-PCR和Western Plot實驗檢測每個受試者的血小板miRNA水平和相關蛋白表達。
　　研究

5、結果：
　　1.通過對一般資料的統(tǒng)計分析后發(fā)現(xiàn)，腦梗死病例組患有糖尿病，冠心病，高血壓以及吸煙，飲酒的比例明顯高于對照組，收縮壓，空腹血糖，以及血小板體積分布寬度水平也高于對照組，高密度脂蛋白水平則低于對照組，兩組之間的差別存在統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。
　　2.51例腦梗死病例組中有8例AR，發(fā)生率為16％，60例對照組中AR有16例，發(fā)生率為27％，兩者之間的差別沒有統(tǒng)計學意義(x2=0.16，P＞0.05)。3.病例

6、組的血小板miR-126水平低于對照組（加AS前），兩者之間差別有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　4.所有研究對象中，AR和NAR的血小板miR-126水平?jīng)]有統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。
　　5.病例組中AR和NAR之間血小板miR-126水平也無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。
　　6.對照組中AR的血小板miR-126的水平明顯高于NAR(P＜0.05)，經(jīng)二元Logistic回歸分析，血小板miR-126是對照組

7、發(fā)生AR的獨立危險因素(0R=0.65，95％CI=1.22～30.05,P=0.03)。
　　7.病例組中血小板miR-200b和miR-495的水平顯著高于對照組，兩者之間的差別有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　8.病例組中，NAR中miR-200b和miR-495的水平明顯高于AR，兩者之間的差別有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　9.對照組中，AR中的miR-223水平顯著高于NAR，兩者之間的差別有統(tǒng)計學意

8、義(P＜0.05)。
　　10.血小板中的PRKAR2B和KLHL5的表達分別與其相應的miRNA:miR-200b和miR-495的表達水平成負相關。腦梗死病人中的PRKAR2B和KLHL5的表達明顯低于對照組（P＜0.05）;而在對照組中，AR中PRKAR2B和KLHL5的表達顯著高于NAR(P＜0.05)。
　　11.血小板中VASP的表達與PRKAR2B無相關性(p＞0.05)。
　　12.在所有研究對象中，C