利用HSV-tk研制肝臟特異損傷的轉基因小鼠模型研究.pdf_第1頁
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1、本研究首先克隆了小鼠血清白蛋白基因啟動子(ALBgenepromoter,Palb)與增強子(ALBgeneenhancer,Ealb),構建了受其調(diào)控的5種表達載體,然后在細胞水平分析比較載體的轉錄活性或殺傷能力,選擇出了細胞水平活性較高的載體進行轉基因小鼠雄原核顯微注射,獲得了目的基因HSV-tk整合與特異表達的轉基因小鼠品系。進一步通過尾靜脈注射GCV誘導轉基因小鼠肝臟損傷,以四氯化碳(carbontetrachloride,CC

2、l4)損傷小鼠為對照觀察疾病的進程。通過血液的生化檢查,肝臟與腎臟等組織的病理形態(tài)學分析來研究轉基因小鼠的損傷效應。本研究為肝病轉基因動物模型的建立,為探討肝病的發(fā)病機制、病理生理過程、病理形態(tài)改變及藥物防治等研究開拓了廣闊的前景?! ”狙芯客ㄟ^參閱文獻,將查閱到的小鼠血清白蛋白基因調(diào)控元件功能區(qū)與GenBank小鼠基因組序列進行同源比較,從而確定我們需要克隆的區(qū)域。利用巢式PCR擴增Palb,利用可信度極高的TaqDNA聚合酶(Py

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