IGF-I和HSV-tk聯(lián)合基因轉(zhuǎn)移優(yōu)化創(chuàng)面愈合的研究.pdf

1、研究目的:創(chuàng)面愈合是燒傷治療的難題,多種因素影響往往導(dǎo)致創(chuàng)面愈合延遲,愈合后瘢痕增生.該研究對(duì)如何優(yōu)化創(chuàng)面愈合,即加速上皮生長促進(jìn)創(chuàng)面愈合、又可防止瘢痕過度增生進(jìn)行了基因治療的嘗試.通過脂質(zhì)體介導(dǎo)外源基因轉(zhuǎn)導(dǎo)燒傷創(chuàng)面的手段,將Ⅰ型胰島素樣生長因子(IGF-I)和單純皰疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)基因聯(lián)合轉(zhuǎn)導(dǎo)燒傷創(chuàng)面,檢測(cè)IGF-I、HSV-tk的表達(dá),觀察IGF-I對(duì)創(chuàng)面愈合的促進(jìn)作用及HSV-tk/GCV對(duì)瘢痕增生的抑制作用,從而為

2、基因治療用于燒傷外科領(lǐng)域打下基礎(chǔ).結(jié)論:該研究采用基因工程技術(shù),成功地將原核表達(dá)載體中的IGF-I和tk基因亞克隆至真核表達(dá)載體pcDNA3.1上,構(gòu)建成功重組真核表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3.1/IGF-I和pcDNA3.1/tk;脂質(zhì)體介導(dǎo)pcDNA3.1/IGF-I和pcDNA3.1/tk到燙傷大鼠創(chuàng)面周圍,可以觀察到IGF-I和tk基因在注射點(diǎn)附近皮膚均可出現(xiàn)陽性表達(dá);傷后適當(dāng)時(shí)間注射GCV可以促進(jìn)tk基因表達(dá)陽性的成纖維細(xì)胞出現(xiàn)凋亡;