IMP3在肺腺癌中的表達與臨床預后的相關性研究及初步機制探討.pdf

1、肺癌是全球發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤，至今發(fā)病率仍在持續(xù)上漲。在衛(wèi)生部最新公布的我國第三次死因調(diào)查中，肺癌居腫瘤死因首位。根據(jù)病理組織學，肺癌主要可分為小細胞肺癌與非小細胞肺癌兩大類，其中非小細胞肺癌又可以分為鱗癌、腺癌和大細胞癌。近年來，肺腺癌的發(fā)病率呈逐漸增高趨勢，已躍居肺癌四大類型之首，且其異質(zhì)性強，死亡率較高，對其發(fā)病機制的研究也顯得十分亟需。本研究首先就2011年肺腺癌IASLC/ATS/ERS國際多學科分類中，浸潤性肺腺癌

2、的五種主要組織學亞型在臨床病理學上的意義及預后的差異進行探討，再研究近年來備受關注的IMP3蛋白在肺腺癌中的的表達及與患者預后的關聯(lián)性，并對IMP3影響肺腺癌侵襲能力的機制做初步探究。本研究共分以下三個部分:
　　第一部分肺腺癌IASLC/ATS/ERS國際多學科分類與預后的關聯(lián)分析
　　目的:肺腺癌IASLC/ATS/ERS國際多學科分類新標準較以往的分類有了較大的改變，其臨床病理學意義和對預后的指導作用有待于更多的研究證

3、實。本研究通過探討五種主要的浸潤性肺腺癌組織學亞型在臨床病理學中的意義及對患者預后的影響，旨在為組織學亞型的臨床應用意義提供更多證據(jù)。
　　材料與方法:收集196例本院浸潤性肺腺癌手術患者的臨床病理資料，對其術后H&E切片進行復片，使用IASLC/ATS/ERS國際多學科分類新標準對其組織學亞型進行判別，并將組織學亞型與各臨床病理參數(shù)進行分層分析;篩選術后隨訪滿18個月以上的共96例患者，分析肺腺癌組織學亞型與患者預后的關系。

4、r>　　結果:浸潤性肺腺癌的五種主要組織學亞型在腫瘤分化程度(P＜0.0001)、淋巴結轉(zhuǎn)移(P=0.015)、原發(fā)腫瘤狀態(tài)(P=0.004)及pTNM分期(P=0.001)等臨床病理指標中均具有總體統(tǒng)計學差異。兩兩比較表明，貼壁亞型在這幾種臨床病理指標中均與其他四種亞型存在統(tǒng)計學差異，提示其主要分布在早期、腫瘤分化較好且無淋巴結轉(zhuǎn)移的肺腺癌病例中。生存分析顯示，與非實體亞型相比，組織學亞型為實體亞型的患者術后無病生存期及總生存期均較短

5、，且多因素分析證實，實體亞型為患者預后差的一項獨立影響因素，在無病生存時間中，其風險比為1.220(95％CI，1.053-1.414; P=0.008);在總生存時間中，風險比為1.224(95％ CI，1.011-1.482; P=0.038)。
　　結論:肺腺癌IASLC/ATS/ERS國際多學科分類中的五種浸潤性腺癌亞型在多種臨床病理參數(shù)間及患者預后中均存在差異，且實體亞型可作為肺腺癌患者預后差的一項獨立影響因素，證實了國

6、際多學科分類在異質(zhì)性較強的肺腺癌中的臨床意義，且為臨床判斷肺腺癌患者的預后提供了一定的理論依據(jù)。
　　第二部分 IMP3在肺腺癌中的表達與臨床預后的相關性研究
　　目的:IMP3蛋白的過表達被認為與惡性腫瘤的組織學高級別、淋巴結轉(zhuǎn)移以及預后差相關，但這一研究結果尚未在肺腺癌中被深入探討。本實驗通過檢測IMP3蛋白在肺腺癌中的表達，及其與臨床病理參數(shù)、患者預后的相關性研究，為IMP3在肺腺癌中的作用提供一定的研究思路。

7、　　材料與方法:使用第一部分的篩選的肺腺癌術后病例，利用免疫組織化學染色的方法對其進行IMP3蛋白表達的檢測，IMP3蛋白表達的結果分為高（中度陽性/強陽性）、低（陰性/弱陽性）兩組，將其與各臨床病理參數(shù)進行分層分析，并將前一部分研究的IASLC/ATS/ERS組織學亞型新分類也納入比較，同時用生存分析研究IMP3蛋白表達與患者預后間的關系。
　　結果:IMP3蛋白的表達高低在腫瘤分化程度、組織學亞型、淋巴結轉(zhuǎn)移、pTNM分期等臨

8、床病理參數(shù)間均具有統(tǒng)計學差異(P值均＜0.0001)，在年齡、性別、原發(fā)腫瘤狀態(tài)中的表達差異則無統(tǒng)計學意義。單因素生存分析顯示，IMP3蛋白高表達與患者術后無病生存期及總生存期較短有關(P＜0.05)，但多因素分析尚不能支持其作為獨立預后因素。
　　結論:IMP3蛋白的高表達更常見于腫瘤組織分化差、實體亞型、有淋巴結轉(zhuǎn)移、pTNM分期晚的患者中，顯示其與肺腺癌的侵襲性增加有關。生存分析證實其表達高低與肺腺癌患者預后有關聯(lián)，但作為獨

9、立預后因素證據(jù)尚不足，提示IMP3蛋白或可作為預測肺腺癌侵襲性及患者預后的一項綜合評判指標。
　　第三部分 IMP3促進肺腺癌細胞侵襲能力的初步機制探討
　　目的:本課題的第二部分結果提示IMP3高表達與肺腺癌的侵襲性增加相關，但其如何促進肺腺癌侵襲的機制尚不清楚。本課題的第三部分主要研究IMP3基因?qū)Ψ蜗侔┘毎w移能力的影響及其與上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymaltransition，EMT)間的

10、關系，初步探討潛在的分子生物學機制。
　　材料與方法:篩選IMP3表達水平不同的肺腺癌細胞株，利用siRNA和過表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染肺腺癌細胞，改變IMP3蛋白表達的水平。利用細胞劃痕實驗觀察轉(zhuǎn)染后肺腺癌細胞遷移能力的變化，并用Western blot檢測IMP3蛋白與EMT相關標記物E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的變化趨勢。
　　結果:IMP3蛋白高表達的細胞株中，上皮細胞標記物E-cadherin表

11、達較低，間質(zhì)細胞標記物N-cadherin、Vimentin的表達較高;而在IMP3蛋白低表達的細胞株中結果則相反。沉默IMP3基因后，E-cadherin表達明顯升高，N-cadherin、Vimentin的表達降低，肺腺癌細胞遷移能力減弱;過表達IMP3基因后，E-cadherin表達降低，N-cadhenn、Vimentin的表達升高，肺腺癌細胞遷移能力亦增加。
　　結論:IMP3表達水平的變化與間質(zhì)細胞標志物N-cadhe