辣根植物殺蟲殺菌活性精油的提取及應(yīng)用研究.pdf

1、植物精油是一類常溫下可以揮發(fā)的、外觀似油狀的液體。由于它具有很強(qiáng)的生物活性，現(xiàn)今已成為植物化學(xué)、農(nóng)藥學(xué)和醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)。部分植物精油對(duì)倉(cāng)儲(chǔ)害蟲、土傳病原真菌、土傳線蟲具有較強(qiáng)的熏蒸生物活性，有望替代現(xiàn)今所使用的熏蒸劑。本文對(duì)具有替代甲基溴潛力的辣根精油進(jìn)行了一系列的研究------辣根殺蟲殺菌精油的提取、分離鑒定；有效活性成分對(duì)倉(cāng)儲(chǔ)害蟲、病原真菌、土傳線蟲等的熏蒸生物活性；有效活性成分對(duì)不同作物種子進(jìn)行熏蒸處理后殘留及藥害等。其主要結(jié)果

2、如下： 1．采用四因素四水平正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)辣根精油進(jìn)行提取工藝研究，辣根精油前體物質(zhì)硫甙最佳水解條件是：每公斤藥材加入20mg的特丁基對(duì)苯二酚，水解120min，水解溫度為65℃，pH為4。然后再接通水蒸汽蒸餾裝置蒸餾120min后，用二氯甲烷萃取，萃取液濃縮，得到精油的含量為7.62％。 2．利用GC和GC-MS對(duì)具有良好熏蒸活性的辣根精油進(jìn)行分析，確定其精油中最高含量的有效成分為烯丙基異硫氰酸酯(AITC)。

3、 3．建立了關(guān)于AITC的快速定量分析檢測(cè)方法，包括紫外分光光度法和氣相色譜法。其中建立的氣相色譜法具有快速、準(zhǔn)確等特點(diǎn)，適用于測(cè)定水蒸氣蒸餾萃取濃縮液中的AITC的含量。其最佳色譜條件如下：GC-9A氣相色譜儀，柱子：OV-1701(DB-17)30m*0.32mm*0.5μm，F(xiàn)ID檢測(cè)器，進(jìn)樣口溫度250℃，柱溫60℃，檢測(cè)器溫度250℃，載氣：N<,2>，流速：1ml/min，補(bǔ)償氣：29 ml/min，空氣：300 ml/mi

4、n，H<,2>：30 ml/min，分流比：1：20，進(jìn)樣量：1μl。 4．測(cè)定了辣根精油活性成分AITC生物活性。當(dāng)AITC的濃度為3μg/ml時(shí)，對(duì)玉米象、赤擬谷盜、谷蠹、書虱的熏蒸活性均接近100％；AITC的濃度達(dá)到3.3μg/ml時(shí)，對(duì)水稻紋枯、山藥枯萎、棉花黃萎和棉花紅腐四種土傳病原真菌的抑制率均在99％以上，當(dāng)AITC的濃度為1.43μg/ml時(shí)，對(duì)蘋果青霉、草莓灰霉、葡萄孢灰霉和小麥赤霉、甘蔗鳳梨、玉米小斑、棉花

5、炭疽、花生白絹8種非土傳病原真菌的抑制率也均在95.0％以上。 5．辣根精油活性成分AITC對(duì)番茄根結(jié)線蟲室內(nèi)盆栽生物活性測(cè)定結(jié)果表明：熏蒸殺番茄根結(jié)線蟲每公斤土壤的致死中量為164.9μl。當(dāng)辣根精油單體AITC的濃度為5μg/mL時(shí)，對(duì)棉花苗期病害(棉花炭疽、棉花紅腐、棉花黃萎)的防治效果可達(dá)80％左右。 6．辣根精油主要活性成分AITC配制成不同濃度，對(duì)大米、水稻種子、小麥種子、紅棗、木耳、煙草熏蒸處理后進(jìn)行殘留及

6、降解研究。結(jié)果表明：在供試濃度范圍內(nèi)，AITC在紅棗、大米、木耳上的殘留量很低，且降解速度也相對(duì)較快，其殘留濃度遠(yuǎn)低于AITC安全使用范圍，表明用烯丙基異硫氰酸酯熏蒸處理過的紅棗、大米、木耳，不會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生任何毒害作用，可安全食用。AITC在表面粗糙的水稻種子、煙草上的殘留量比較高，且持效期長(zhǎng)，有利于種子的長(zhǎng)期保存。 7．辣根精油活性成分AITC對(duì)不同的作物種子熏蒸時(shí)，其使用濃度有一定的限制。用于熏蒸禾谷類種子特別要謹(jǐn)慎，當(dāng)使用