基于GC-MS的代謝組學方法篩選輻射生物劑量血漿標志物的初步研究.pdf

1、核戰(zhàn)爭和災難性核事故的發(fā)生會造成大量傷員,在對此類傷員的緊急醫(yī)學救治中,早期、快速檢測傷員受照劑量的大小,是合理利用有限醫(yī)療資源,科學制定救治策略,提高救治效率和存活率的關鍵環(huán)節(jié)。本文探索性地運用基于氣相色譜-質譜聯(lián)用(GC-MS)的代謝組學方法,篩選出潛在的輻射生物劑量標志物,并將其用于輻射傷情分類的研究。此外,對這些代謝標志物的生物學意義以及關鍵代謝通路進行了初步探討。本研究為發(fā)展快速、簡便、靈敏和準確的電離輻射生物劑量計以及揭示急

2、性電離輻射損傷和修復的分子機制提供了實驗依據(jù)。
　　1.建立了基于GC-MS聯(lián)用技術的血漿代謝物分析方法。以N-O-雙(三甲硅基)三氟乙酰胺(MSTFA)-兩步衍生法為基礎,對樣品制備方法(如萃取劑的選擇、萃取劑用量、衍生化條件)和GC-MS分析條件(如升溫程序條件)進行了優(yōu)化。此外,對包括精密度、重現(xiàn)性及穩(wěn)定性在內的分析方法特性進行了考察。在此基礎上,將NIST質譜數(shù)據(jù)庫搜索和標準品驗證相結合完成對血漿代謝物的結構鑒定。

3、　　2.利用建立的GC-MS血漿代謝物分析方法,從劑量效應(0Gy,2Gy,4Gy,6Gy,8Gy)考察了不同時間點(輻射后5h,24h,48h和72h)電離輻射對大鼠血漿代謝物的影響,進行輻射損傷傷情分類的研究并篩選出潛在的輻射生物劑量標志物,輻射生物劑量血漿標志物的篩選是利用遺傳算法與隨機森林相結合。結果表明,輻射后5 h、48h及72h的傷情分類均為100％,24h除輕度傷情分類為92％外,其余均為100％。
　　3.將不同