孕期鐵缺乏對(duì)大鼠下丘腦-垂體-腎上腺軸影響的研究.pdf

1、目的：建立大鼠圍產(chǎn)期鐵缺乏模型并觀察其一般狀況，檢測(cè)大鼠圍產(chǎn)期血液學(xué)參數(shù)：血紅蛋白(Hb)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、紅細(xì)胞平均體積(MCV)、血細(xì)胞比容(PCV或HCT)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量(MCH)、紅細(xì)胞體積分布寬度(RDW)，鐵蛋白(Fn)，促紅細(xì)胞生成素(EPO)和胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)，同時(shí)檢測(cè)大鼠圍產(chǎn)期內(nèi)分泌腺體激素分泌水平，觀察其子代是否出現(xiàn)低出生體重現(xiàn)象；探討新生鼠內(nèi)分泌腺體和肝組織促紅細(xì)胞生成素受體(EP

2、OR)表達(dá)情況以及新生鼠肝臟組織EPO和IGF-1濃度是否受親代鐵缺乏的影響；初步完成下丘腦、垂體、腎上腺體外培養(yǎng)嘗試，為后期下丘腦-垂體-腎上腺軸(HPA)分泌功能的研究做鋪墊。
　　方法：選擇健康Wistar雌鼠32只，適應(yīng)性飼喂1周后，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組用含鐵元素10.0mg/Kg的低鐵飼料飼養(yǎng)，對(duì)照組以含鐵元素216.0mg/Kg的對(duì)照組飼料飼養(yǎng)，其他條件均相同，開始干預(yù)。干預(yù)4周后再與健康雄鼠同籠交配，雌鼠孕

3、期繼續(xù)低鐵飼料干預(yù)直至分娩，在圍產(chǎn)期檢測(cè)孕鼠的Fn、EPO、IGF-1和血液學(xué)指標(biāo)，同時(shí)檢測(cè)內(nèi)分泌腺體分泌的相關(guān)激素。子代出生后，觀察新生鼠出生情況并稱其出生體重。取新生鼠的丘腦、垂體和腎上腺及肝臟組織等，將這些組織制成組織切片，觀察其EPOR的表達(dá)情況，同時(shí)用肝組織制備組織勻漿檢測(cè)其EPO和IGF-1水平，另外對(duì)丘腦、垂體和腎上腺進(jìn)行體外培養(yǎng)嘗試,利用人促紅細(xì)胞生成素刺激單一內(nèi)分泌腺體細(xì)胞，檢測(cè)內(nèi)分泌腺體分泌的相應(yīng)激素：生長(zhǎng)激素(GH

4、)、生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)、促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)、腎上腺素(EPI)及皮質(zhì)酮(CORT)等水平變化。
　　結(jié)果：①大鼠圍產(chǎn)期鐵缺乏模型成功建立。圍產(chǎn)期實(shí)驗(yàn)鼠Hb、MCV、PCV、MCH、Fn、IGF-1、GH及CORT明顯低于對(duì)照組，兩組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)；而RDW，血漿ACTH、GHRH、EPI，血漿和肝組織勻漿EPO水平均顯著增加，兩組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)；②實(shí)驗(yàn)組大鼠出現(xiàn)難

5、產(chǎn)現(xiàn)象，并且其新生鼠死胎率較對(duì)照組高；與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組新生鼠肝組織勻漿中IGF-1顯著降低(p＜0.05)；③實(shí)驗(yàn)組新生鼠的垂體，腎上腺，肝臟都有EPOR表達(dá)，略高于對(duì)照組；④初步掌握下丘腦、垂體、腎上腺的體外培養(yǎng)技術(shù)；⑤EPO刺激內(nèi)分泌腺體細(xì)胞，其激素分泌水平實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。
　　結(jié)論:1.大鼠圍產(chǎn)期鐵缺乏模型成功建立。
　　2.大鼠圍產(chǎn)期鐵缺乏使親代Fn、EPO、GH、IGF-1、GH