大豆皂苷的分離檢測(cè).pdf

1、大豆皂苷是大豆中含有的一類(lèi)重要的生物活性成分。近年研究表明，大豆皂苷具有顯著的降血脂和抗動(dòng)脈粥樣硬化等多種重要的生理功能，可開(kāi)發(fā)成保健食品或藥品，同時(shí)它還是一種重要的發(fā)泡劑、乳化劑、穩(wěn)定劑和風(fēng)味改良劑，市場(chǎng)潛力大。本文以脫脂大豆胚芽為原料，通過(guò)溶劑浸提，大孔吸附樹(shù)脂（MAR）與陽(yáng)離子交換樹(shù)脂（CER）聯(lián)用富集、純化總皂苷，凝膠滲透色譜（GPC）進(jìn)一步去雜，利用制備高效液相色譜（PRE-HPLC），蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSD）與二極管陣列

2、檢測(cè)器（PAD）并用，液相色譜-質(zhì)譜（LC-MS）聯(lián)用分析，分離，制備大豆皂苷單體。在此基礎(chǔ)上，建立了大豆皂苷的高效液相色譜（HPLC）內(nèi)標(biāo)定量方法與苷元比色定量方法。主要研究?jī)?nèi)容如下： ⑴成功分離出了5種大豆皂苷單體，通過(guò)高效液相色譜-電噴霧電離質(zhì)譜（LC-ESI/MS）方法分析確認(rèn)其各自皂苷種類(lèi)。5種皂苷單體分別為大豆皂苷Aa，Ab，Ba，Bb，Be。通過(guò)ELSD-HPLC分析，5種大豆皂苷單體的峰面積百分?jǐn)?shù)都高達(dá)95％以上

3、。 ⑵建立了以馬萘雌酮為內(nèi)標(biāo)物，通過(guò)ELSD-HPLC內(nèi)標(biāo)法測(cè)定大豆皂苷Ab、Bb的定量方法。各自分別在0.1～0.5mg/Ml范圍內(nèi)呈良好的線(xiàn)性關(guān)系。大豆皂苷Ab線(xiàn)性回歸方程為：lgy=1.6658lgx-0.7123，R2=0.9995?；厥章试?8.2％～100.3％之間，具有較高的回收率、穩(wěn)定性和重現(xiàn)性。大豆皂苷Bb線(xiàn)性回歸方程為：lgy=1.8734lgx-0.9667，R2=0.9998?；厥章试?7.7％～100.

4、2％之間，具有較高的回收率、穩(wěn)定性和重現(xiàn)性。通過(guò)大豆皂苷Ab可定量A組大豆皂苷，通過(guò)大豆皂苷Bb可定量B組大豆皂苷。并通過(guò)此兩組皂苷計(jì)算大豆總皂苷含量。 ⑶以香草醛-高氯酸為顯色劑、冰醋酸為溶劑，自制高純度大豆皂苷Bb為標(biāo)準(zhǔn)品，通過(guò)大豆皂苷苷元顯色，在563nm處測(cè)定大豆皂苷元的含量，建立了利用大豆皂苷元特征顯色方法定量測(cè)定大豆總皂苷含量的方法。在0.0106～0.0743μmol皂苷元范圍內(nèi)呈良好的線(xiàn)性關(guān)系，回歸方程為y=12