電針對ZDF大鼠骨骼肌SIRT1表達和氧化應(yīng)激的影響研究.pdf

1、目的：
　　本課題選用Zucker diabetic fatty（ZDF）遺傳性糖尿病肥胖大鼠，采用“標本配穴”電針干預(yù)方法，觀察電針對ZDF大鼠的治療作用，對骨骼肌線粒體超微結(jié)構(gòu)、SIRT1表達及股四頭肌中氧化應(yīng)激相關(guān)產(chǎn)物的影響，試圖闡釋電針可能通過影響骨骼肌線粒體超微結(jié)構(gòu)和氧化應(yīng)激改善ZDF大鼠血糖和胰島素抵抗的機制。
　　方法：
　　7周齡雄性ZDF大鼠12只，同窩未變異的背景瘦鼠4只（無脂質(zhì)等代謝紊亂，無胰島素

2、抵抗）。將12只ZDF大鼠隨機分為：電針組(EA)4只，非電針刺激組(NE)4只，模型對照組(MC)4只。同窩瘦鼠4只為正常對照組(NC)。
　　EA組大鼠按“標本配穴”電針法，取“關(guān)元”、“中脘”、雙側(cè)“后三里”和“豐隆”穴。“關(guān)元”穴向劍突方向和“中脘”穴向恥骨聯(lián)合方向斜刺3mm。“后三里”和“豐隆”垂直進針3mm左右。電針采用韓式電針儀，同側(cè)“后三里”、“豐隆”穴接同一輸出的兩個電極，另一組電針接“關(guān)元”，“中脘”。選連續(xù)波

3、，頻率2Hz，強度1mA,留針10min。NE組大鼠針刺入后不予手法、不予電針刺激，其余針刺部位和操作同EA組。EA、NE組大鼠每日針刺1次，每周3次，共治療3周。
　　治療中及治療結(jié)束后，取材檢測：①基礎(chǔ)指標和生化指標檢測：大鼠體重，進食量、飲水量，空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）和餐后血糖(postprandial blood glucose，PBG)，以上檢測每周一次；②形態(tài)學(xué)檢測：在透射電鏡下

4、觀察股四頭肌線粒體的結(jié)構(gòu)、形態(tài)和數(shù)目；③蛋白的檢測：運用蛋白印跡法Western Blot檢測股四頭肌中SIRT1的表達；④氧化應(yīng)激相關(guān)指標檢測：采用分光光度計比色法檢測股四頭肌活性氧（ROS）及丙二醛（MDA）表達水平和抑制氧自由基相關(guān)酶超氧化物歧化酶（SOD）活性。
　　結(jié)果：
　　1．與同窩瘦鼠相比，ZDF模型大鼠進食量、飲水量增多，體重增加，空腹血糖和餐后血糖升高；電針治療3周后，與模型組比較，電針組大鼠進食量、飲水

5、量、體重、空腹血糖和餐后血糖均下降（P<0.05）。
　　2.與同窩瘦鼠相比，ZDF模型大鼠股四頭肌線粒體超微結(jié)構(gòu)不一、結(jié)構(gòu)異常，數(shù)目減少；電針治療3周后，與模型組比較，EA組股四頭肌線粒體超微結(jié)構(gòu)較完整，無腫脹變形，數(shù)目增多。
　　3．與同窩瘦鼠相比，ZDF模型大鼠股四頭肌中SIRT1表達明顯降低（P<0.05）；電針治療3周后，電針組大鼠股四頭肌中SIRT1表達增多，與模型組比較，差異具有顯著性意義（P<0.05）。

6、r>　　4.與同窩瘦鼠相比，ZDF模型大鼠股四頭肌SOD活性降低，MDA、ROS含量增高，具有顯著性差異（P<0.05）；電針治療3周后，電針組大鼠股四頭肌SOD活性升高，MDA、ROS含量降低，與模型大鼠比較，具有顯著性差異（P<0.05）。
　　5.3周療程結(jié)束后，非電針刺激法對胰島素抵抗大鼠進食量、餐后血糖和骨骼肌中SIRT1的表達有所改善（P<0.05）；對飲水量、線粒體超微結(jié)構(gòu)和氧化應(yīng)激相關(guān)指標影響不明顯，與ZDF模型大

7、鼠比較，差異無顯著性意義（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.“標本配穴”電針法治療3周能減少ZDF大鼠進食量、飲水量，有效控制遺傳性糖尿病肥胖大鼠的體重增長，降低空腹血糖和餐后血糖。
　　2.“標本配穴”電針法能促進ZDF大鼠骨骼肌受損線粒體結(jié)構(gòu)的恢復(fù)和融合，上調(diào)SIRT1表達，增強抗氧化酶SOD活性，清除氧自由基，從而減少脂質(zhì)過氧化物MDA合成，使機體免受氧自由基損傷，這可能是電針降低血糖、減輕或控制胰島素抵抗的