電針對(duì)ZDF大鼠骨骼肌SIRT1表達(dá)和氧化應(yīng)激的影響研究.pdf

1、目的：
　　本課題選用Zucker diabetic fatty（ZDF）遺傳性糖尿病肥胖大鼠，采用“標(biāo)本配穴”電針干預(yù)方法，觀察電針對(duì)ZDF大鼠的治療作用，對(duì)骨骼肌線粒體超微結(jié)構(gòu)、SIRT1表達(dá)及股四頭肌中氧化應(yīng)激相關(guān)產(chǎn)物的影響，試圖闡釋電針可能通過(guò)影響骨骼肌線粒體超微結(jié)構(gòu)和氧化應(yīng)激改善ZDF大鼠血糖和胰島素抵抗的機(jī)制。
　　方法：
　　7周齡雄性ZDF大鼠12只，同窩未變異的背景瘦鼠4只（無(wú)脂質(zhì)等代謝紊亂，無(wú)胰島素

2、抵抗）。將12只ZDF大鼠隨機(jī)分為：電針組(EA)4只，非電針刺激組(NE)4只，模型對(duì)照組(MC)4只。同窩瘦鼠4只為正常對(duì)照組(NC)。
　　EA組大鼠按“標(biāo)本配穴”電針?lè)?，取“關(guān)元”、“中脘”、雙側(cè)“后三里”和“豐隆”穴?！瓣P(guān)元”穴向劍突方向和“中脘”穴向恥骨聯(lián)合方向斜刺3mm?！昂笕铩焙汀柏S隆”垂直進(jìn)針3mm左右。電針采用韓式電針儀，同側(cè)“后三里”、“豐隆”穴接同一輸出的兩個(gè)電極，另一組電針接“關(guān)元”，“中脘”。選連續(xù)波

3、，頻率2Hz，強(qiáng)度1mA,留針10min。NE組大鼠針刺入后不予手法、不予電針刺激，其余針刺部位和操作同EA組。EA、NE組大鼠每日針刺1次，每周3次，共治療3周。
　　治療中及治療結(jié)束后，取材檢測(cè)：①基礎(chǔ)指標(biāo)和生化指標(biāo)檢測(cè)：大鼠體重，進(jìn)食量、飲水量，空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）和餐后血糖(postprandial blood glucose，PBG)，以上檢測(cè)每周一次；②形態(tài)學(xué)檢測(cè)：在透射電鏡下

4、觀察股四頭肌線粒體的結(jié)構(gòu)、形態(tài)和數(shù)目；③蛋白的檢測(cè)：運(yùn)用蛋白印跡法Western Blot檢測(cè)股四頭肌中SIRT1的表達(dá)；④氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)：采用分光光度計(jì)比色法檢測(cè)股四頭肌活性氧（ROS）及丙二醛（MDA）表達(dá)水平和抑制氧自由基相關(guān)酶超氧化物歧化酶（SOD）活性。
　　結(jié)果：
　　1．與同窩瘦鼠相比，ZDF模型大鼠進(jìn)食量、飲水量增多，體重增加，空腹血糖和餐后血糖升高；電針治療3周后，與模型組比較，電針組大鼠進(jìn)食量、飲水

5、量、體重、空腹血糖和餐后血糖均下降（P<0.05）。
　　2.與同窩瘦鼠相比，ZDF模型大鼠股四頭肌線粒體超微結(jié)構(gòu)不一、結(jié)構(gòu)異常，數(shù)目減少；電針治療3周后，與模型組比較，EA組股四頭肌線粒體超微結(jié)構(gòu)較完整，無(wú)腫脹變形，數(shù)目增多。
　　3．與同窩瘦鼠相比，ZDF模型大鼠股四頭肌中SIRT1表達(dá)明顯降低（P<0.05）；電針治療3周后，電針組大鼠股四頭肌中SIRT1表達(dá)增多，與模型組比較，差異具有顯著性意義（P<0.05）。

6、r>　　4.與同窩瘦鼠相比，ZDF模型大鼠股四頭肌SOD活性降低，MDA、ROS含量增高，具有顯著性差異（P<0.05）；電針治療3周后，電針組大鼠股四頭肌SOD活性升高，MDA、ROS含量降低，與模型大鼠比較，具有顯著性差異（P<0.05）。
　　5.3周療程結(jié)束后，非電針刺激法對(duì)胰島素抵抗大鼠進(jìn)食量、餐后血糖和骨骼肌中SIRT1的表達(dá)有所改善（P<0.05）；對(duì)飲水量、線粒體超微結(jié)構(gòu)和氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)影響不明顯，與ZDF模型大

7、鼠比較，差異無(wú)顯著性意義（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.“標(biāo)本配穴”電針?lè)ㄖ委?周能減少ZDF大鼠進(jìn)食量、飲水量，有效控制遺傳性糖尿病肥胖大鼠的體重增長(zhǎng)，降低空腹血糖和餐后血糖。
　　2.“標(biāo)本配穴”電針?lè)艽龠M(jìn)ZDF大鼠骨骼肌受損線粒體結(jié)構(gòu)的恢復(fù)和融合，上調(diào)SIRT1表達(dá)，增強(qiáng)抗氧化酶SOD活性，清除氧自由基，從而減少脂質(zhì)過(guò)氧化物MDA合成，使機(jī)體免受氧自由基損傷，這可能是電針降低血糖、減輕或控制胰島素抵抗的