微生物酶法拆分消旋芳香族氨基酸的研究.pdf

1、通過單因子和多因子搖瓶正交試驗，確定了米曲霉液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)氨基酰化酶的最佳發(fā)酵條件。優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基組成(ρ/g L-1)：葡萄糖40，蔗糖10，可溶性淀粉20，蛋白胨2.5，馬鈴薯液1000mL，pH自然。培養(yǎng)基裝量50mL/250mL三角瓶，接種量4％。培養(yǎng)溫度30℃，轉速100 rmin-1，發(fā)酵時間42h。每50mL培養(yǎng)物的總酶活由優(yōu)化前的2627U提高到7338U，是優(yōu)化前的2.79倍。
　　 研究了米曲霉氨基?；傅牟糠置?/p>

2、學性質，該酶催化反應的最適pH為7.0，最適溫度為40℃，低濃度的Co2+(5×10-4mol/L)對酶活激活作用顯著，催化反應過程中，底物濃度大于0.2 mol/L時，存在高濃度底物抑制酶活力現(xiàn)象。
　　 初步探索了包埋法固定化米曲霉氨基酰化酶的載體，在實驗的五種載體中，以海藻酸鈉為載體包埋固定化米曲霉氨基?；该富畋Ａ袈矢撸也僮骱唵?，成本低廉。對包埋法固定化米曲霉氨基?；该笇W性質進行了研究，較游離米曲霉氨基?；福钸m溫

3、度未發(fā)生改變，最適pH向堿性范圍偏移至8.0，對酸堿和熱的穩(wěn)定性增強，最適底物濃度增大到0.4 mol/L。
　　 根據(jù)氨基?；改芰Ⅲw專一水解L-氨基?；锏奶攸c，利用米曲霉氨基酰化酶對消旋苯丙氨酸進行了拆分。在米曲霉氨基酰化酶選擇性的作用于底物N-乙酰-L-苯丙氨酸，得到L-苯丙氨酸后，通過732陽離子樹脂和結晶法分別將L-苯丙氨酸和N-乙酰-D-苯丙氨酸分離，N-乙酰-D-苯丙氨酸通過酸水解脫去乙?；玫紻-苯丙氨酸，拆分