宮頸癌中P21、Ki-67和IMP3基因表達(dá)的研究.pdf

1、研究目的:
　　宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤之一。原位癌高發(fā)年齡為30-35歲，浸潤癌為45-55歲，近年來其發(fā)病有年輕化的趨勢。因此宮頸癌的早期診斷、預(yù)后評估及各種治療方法是人們研究的焦點(diǎn)。本研究擬檢測P21、Ki-67和IMP3蛋白在CIN和宮頸癌組織及宮頸癌細(xì)胞株中的表達(dá)強(qiáng)弱以及是否有一致的表達(dá)關(guān)系。
　　研究方法:
　　(1)細(xì)胞培養(yǎng)與處理:從人正常宮頸組織中分離的宮頸上皮細(xì)胞(HCEC)及人宮頸癌細(xì)胞系的C3

2、3a、 HeLa、SiHa，于抗生素（鏈霉素和100U/ml青霉素）的RPMll640和含10％胎牛血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，至細(xì)胞生長至80-90％的密度時，用TRIZOL及RIPA裂解液提取細(xì)胞裂解產(chǎn)物，行Real-time PCR技術(shù)檢測P21、Ki-67和IMP3的mRNA表達(dá)水平以及Westernblot法檢測P21、Ki-67和IMP3的蛋白水平。(2)免疫組化技術(shù)(IHC):免疫組織化學(xué)法檢測30例正常宮頸組織、30例CIN、3

3、0例宮頸癌組織中p21、Ki-67和IMP3蛋白的表達(dá)情況。
　　研究結(jié)果:
　　HeLa、SiHa、C33a細(xì)胞的P21、Ki-67和IMP3的mRNA及蛋白表達(dá)水平均高于人正常宮頸上皮細(xì)胞。正常宮頸組織中P21、Ki-67和IMP3的表達(dá)很弱，在CIN組織中P21、Ki-67和IMP3的表達(dá)陽性，而宮頸癌組織中P21、Ki-67和IMP3的表達(dá)呈強(qiáng)陽性。
　　結(jié)論及意義:
　　P21、Ki-67和IMP3蛋白