姜黃素衍生物C086抗腫瘤轉(zhuǎn)移作用及對裸鼠移植瘤生長的影響.pdf

1、目的：對姜黃素衍生物C086體內(nèi)外抗腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移作用研究,并對其抗腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機制進(jìn)行初步研究,為C086體內(nèi)外抗腫瘤作用提供依據(jù)。
　　方法：(1)采用采用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法體外檢測C086對胃癌細(xì)胞的增殖抑制作用。(2)采用集落形成試驗檢測C086對胃癌細(xì)胞SGC-7901克隆原細(xì)胞的抑制作用。(3)采取劃痕實驗方法和Transwell小室法檢測C086對胃癌細(xì)胞SGC-7901遷移能力和侵襲能力的影響。(4)應(yīng)用We

2、sternblot法檢測C086處理過的胃癌細(xì)胞SGC-7901中MMP-2和MMP-9中蛋白的含量。(5)建立小鼠肝癌H22細(xì)胞腹水瘤肺轉(zhuǎn)移模型,評價C086體內(nèi)抗腫瘤轉(zhuǎn)移活性。(6)建立裸小鼠SGC-7901人胃癌細(xì)胞移植瘤模型,評價C086體內(nèi)抗腫瘤生長活性。(7)Western-blot檢測C086對SGC-7901裸鼠異種移植瘤中Erk1/2,C-Myc和Bcl-2蛋白含量。(8)采用流式細(xì)胞儀檢測C086對胃癌細(xì)胞SGC-7

3、901凋亡的影響。
　　結(jié)果：(1)C086對SGC-7901的增殖抑制作用表現(xiàn)出明顯的量效和時效關(guān)系,C086作用48h和72h后的IC50值分別是5.29μg/mL和4.17μg/mL。(2)隨著藥物濃度不斷增加,集落形成抑制率逐漸升高,并表現(xiàn)出一定的劑量依賴性,半數(shù)抑制濃度為0.55μg/mL。(3)經(jīng)過不同濃度C086處理細(xì)胞一定時間后,SGC-7901細(xì)胞的侵襲能力和移動能力均低于對照組。2μg/mL、4μg/mL、8μ

4、g/mLC086的侵襲抑制率分別達(dá)到了50.65％、72.73%和89.61%(P<0.05)。(4)經(jīng)過C086作用24h后的胃癌細(xì)胞SGC-7901中MMP-2和MMP-9的蛋白含量均有減少。(5)C08650mg/kg、C086100mg/kg、C086200mg/kg口服每天給藥后對小鼠H22肺轉(zhuǎn)移的結(jié)節(jié)抑制率分別為28.0%、41.5%和59.7%。通過對肺組織切片HE染色觀察,發(fā)現(xiàn)C086很好地保護(hù)了給藥組的肺組織,使之受到

5、癌細(xì)胞的侵襲較少,抑制了腫瘤細(xì)胞的肺轉(zhuǎn)移。(6)C086微乳100mg/kg、150mg/kg口服每天給藥后對裸小鼠SGC-7901人胃癌移植瘤的抑制率分別達(dá)到52.3%,57.2%。(7)免疫印跡結(jié)果顯示,不同給藥劑量的C086裸鼠不同瘤塊組織中可見Bcl-2、C-Myc和Erk1/2蛋白含量均減少,并呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。(8)C086能夠誘導(dǎo)SGC-7901細(xì)胞中晚期和晚期凋亡。
　　結(jié)論：實驗結(jié)果表明,C086具有體內(nèi)外抗腫