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文檔簡介
1、研究背景和目的: 姜黃素(Curcumin,Cur),系從姜科植物姜黃中提取的酚性有效單體化合物,具有抗腫瘤、抗氧化、抗突變、抗炎、抗血小板聚集等廣泛的藥理作用⑴。近年來,有關(guān)姜黃素的藥理學(xué)研究尤其在抑制細胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡等方面的作用日益受到重視。但是姜黃素水溶性差,水溶液易水解,首過消除現(xiàn)象明顯,生物利用度低,成為限制其臨床應(yīng)用的主要因素和產(chǎn)業(yè)化的瓶頸⑵。本實驗保留分子中共扼β-二酮鏈等活性必需基團,設(shè)計合成新的姜黃素
2、衍生物FM04。本文降進一步研究FM04對體外培養(yǎng)的腫瘤細胞和動物移植性腫瘤的抑制作用及特點,并初步探討它的作用機制。 研究方法: 應(yīng)用MTT法檢測姜黃素衍生物FM04對細胞增殖的影響;應(yīng)用集落形成法觀察FM04對細胞增殖的影響;應(yīng)用光學(xué)顯微鏡觀察細胞形態(tài)變化,應(yīng)用AO/EB熒光染色法觀察細胞凋亡;采用Annexin V-FITC/PI雙染后流式細胞儀檢測細胞凋亡率。FM04(50mg/kg/d)連續(xù)腹腔注射10天,觀察
3、FM04對小鼠黑色素瘤B16的生長抑制率。應(yīng)用Western blot法檢測P210bcr/abl及其下游通路蛋白表達的變化和線粒體細胞色素C的變化;比色法測定Caspase-3、Caspase-9活化程度。 研究結(jié)果: FM04能顯著抑制多種腫瘤細胞增殖,呈時間和劑量依賴關(guān)系;能影響K562細胞的集落形成,呈量效關(guān)系;連續(xù)腹腔注射FM04(50mg/kg/d)10天,對小鼠黑色素瘤B16的生長抑制率54.1%,與對照組
4、相比具有顯著性差異(P<0.05),說明FM04在體內(nèi)、體外試驗均表現(xiàn)出良好的腫瘤抑制作用。FM04可顯著下調(diào)P210bcr/abl及其下游信號通路蛋白;可促進細胞色素C釋放入胞漿,激活caspase-3/9的活性,觸發(fā)K562細胞凋亡。 結(jié)論: FM04具有顯著的體內(nèi)、外抗腫瘤作用,對于K562細胞,能通過減少P210的蛋白含量從而下調(diào)p210Bcr-Abl下游多種信號分子表達,通過激活caspase的活化和線粒體內(nèi)細
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