羥基紅花黃色素A對永久性腦缺血大鼠炎癥反應通路相關因子調控機制初探.pdf

1、羥基紅花黃色素A(hydroxysafflor yellow A，HSYA)是紅花中的單體有效成分，近年來，對HSYA各方面藥理活性進行了廣泛研究，特別是抗腦缺血方面，HSYA顯示了有效的抗腦缺血活性，其中涉及的機制包括抗血小板聚集，抗氧化自由基損傷，抗興奮性氨基酸毒性等等，然而對其抗腦缺血后炎癥的研究目前較少。 前期，我們的基因芯片結果提示HSYA可能發(fā)揮調節(jié)炎癥因子轉錄表達的作用，為了進一步深入闡明HSYA抗腦缺血的機制，本

2、研究采用線栓法制備大鼠永久性腦缺血模型，首先比較不同HSYA給藥方式，并最終選取以HSYA靜脈注射半衰期為間隔連續(xù)多次給藥這一最佳方案，觀察HSYA對永久性腦缺血大鼠炎癥信號轉導途徑核轉錄因子kB調節(jié)通路相關因子的作用。 于缺血后3h，6h，12h，24h取大腦皮層：Western blotting檢測細胞核及胞漿核轉錄因子NF-κB p65及胞漿磷酸化IκB-α(pIκB-α)蛋白水平表達；Trans AM試劑盒檢測NF-κB

3、 DNA結合活性；RT-PCR檢測炎性因子TNF-α，IL-1β，IL-6，IL-10轉錄水平表達。ELISA檢測上述炎性因子的蛋白水平表達。同時，還將HSYA的作用強度與NF-xB抑制劑--二硫代氨基甲酸吡咯烷銨(Pyrrolidine dithiocarbamate ammonium salt，PDTC)做比較。最后，HPLC法進行了HSYA在缺血大鼠腦組織及血漿中的含量測定，并以核磁共振為研究手段進行了初步的HSYA抗腦缺血皮層腦

4、組織的代謝組學研究。結果表明，大鼠腦缺血后連續(xù)多次靜脈注射HSYA(10mg·kg-1)，能夠顯著抑制NF-κB通路p65核轉位以及IκB-α的磷酸化，降低NF-κB DNA結合活性，并降低促炎性因子TNF-α，IL-1β，IL-6 mRNA及蛋白水平的表達，升高抗炎因子IL-10 mRNA及蛋白表達水平，能夠抑制缺血后腦組織毒性代謝產物乳酸及谷氨酸的含量，升高GABA及葡萄糖，提示HSYA的抗腦缺血作用可能與其抑制炎癥信號途徑中NF-