羥基紅花黃色素A的降血壓作用及其機(jī)制研究.pdf

1、紅花是我國(guó)傳統(tǒng)的中草藥，為菊科植物的干燥花，臨床上主要用于冠心病、腦血栓等多種血液循環(huán)障礙性疾病的治療，紅花生物活性成分是當(dāng)前植物藥研究和應(yīng)用的熱點(diǎn)之一。羥基紅花黃色素 A（HSYA）是從紅花中提取到的含量較高的水溶性單體成分，是一種查耳酮葡萄糖苷。研究表明 HSYA 對(duì)心肌、腦缺氧缺血有保護(hù)作用，也可通過(guò)抑制血小板活化因子（PAF）產(chǎn)生和 PAF的作用，抑制血小板黏附、釋放，緩解血栓形成和炎癥反應(yīng)等病理變化，減輕了血液循環(huán)障礙。有研究

2、表明紅花黃色素（SY）能夠增加缺血心肌的冠脈流量，起到保護(hù)心肌的作用，也有研究者觀察到 SY 有降低血壓作用，但其作用的具體機(jī)制尚不十分明確。本實(shí)驗(yàn)觀察 HSYA 對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）血壓和離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)收縮功能的影響，并對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行初步探討。 目的:探討 HSYA 對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)收縮功能和血壓的影響及其機(jī)制。 方法: 1. 胸主動(dòng)脈環(huán)的張力實(shí)驗(yàn)頸椎脫位法處死大鼠，迅速取出胸主動(dòng)脈，制成 3

3、 mm 長(zhǎng)的環(huán)形標(biāo)本，懸掛于充有 10 ml Krebs 溶液的浴槽中，持續(xù)通以 95％O2+5％CO2，恒溫 37℃。Powerlab生物信號(hào)采集分析系統(tǒng)記錄血管環(huán)張力，動(dòng)脈收縮的前負(fù)荷為2 g，平衡 90 min。血管用 KCl（6×10-2 mol/L）預(yù)收縮 3 次以激發(fā)血管環(huán)活性。用牙簽卷少量棉花插入血管輕輕旋轉(zhuǎn)和前后移動(dòng)以去除內(nèi)皮，用 1×10-5 mol/L Ach 引起血管舒張反應(yīng)檢驗(yàn)內(nèi)皮存在與否。在浴槽中加入 HSYA

4、 孵育 20min后，觀察對(duì) KCl和 PE 引起血管收縮作用的影響。用 Scott 比值法計(jì)算最大收縮張力（Tmax）、達(dá)到1/2 Tmax 所需的濃度（EC50）和血管收縮的抑制率〔抑制率=（實(shí)驗(yàn)組 Tmax -對(duì)照組 Tmax）/對(duì)照組 Tmax ×100％〕。 2. 血壓測(cè)定SHR和 WKY 各 12 只隨機(jī)分為HSYA組（20 mg/kg）和生理鹽水對(duì)照組。大鼠給予戊巴比妥鈉（40 mg/kg）麻醉后，于頸部正中做 0

5、.7～1.0 cm 切口，分離出右側(cè)頸總動(dòng)脈，將動(dòng)脈導(dǎo)管向心臟方向插入 1.5 cm，通過(guò)壓力換能器與 Powerlab生物信號(hào)采集分析系統(tǒng)相連，連續(xù)觀察大鼠動(dòng)脈血壓變化；左側(cè)股靜脈插管給藥。 結(jié)果: 1.HSYA 對(duì)血管收縮功能的影響 （1）HSYA 對(duì) KCl 引起血管收縮張力的影響KCl （6×10-2 mol/L）可使血管發(fā)生收縮，產(chǎn)生張力為4.76±0.37 （g）。與對(duì)照組相比，在浴槽中加入 HSY

6、A 孵育 20 min后，可濃度依賴性抑制 KCl 引起的血管收縮；當(dāng) HSYA為1×10-6、1×10-5和 1×10-4 mol/L時(shí)抑制率分別為6.58％、22.88％和 34.34％。這種抑制作用在有內(nèi)皮組和去內(nèi)皮組間無(wú)差別。 （2）HSYA 對(duì) PE 引起血管收縮張力的影響PE（1×10-9～1×10-4 mol/L）可引起血管呈濃度依賴性收縮。與對(duì)照組相比，在浴槽中加入不同濃度 HSYA（1×10-6～1×10-4

7、mol/L）孵育 20 min后，PE 引起胸主動(dòng)脈環(huán)收縮作用減弱，Tmax 隨 HSYA 濃度的增加而減小。PE（1×10-9～1×10-4 mol/L）引起血管收縮的 EC50 在有內(nèi)皮和去內(nèi)時(shí)分別為1.84×10-5 mol/L和 1.79×10-5 mol/L，統(tǒng)計(jì)學(xué)無(wú)差別。 （3）HSYA對(duì)主動(dòng)脈環(huán)CaCl2量-效曲線的影響在無(wú)鈣 Krebs 溶液中加入PE(1×10-6 mol/L)，收縮張力僅 0.68±0.07（

8、g），隨著 CaCl2的濃度（1×10-5～3×10-3 mol/L) 增高，血管環(huán)收縮張力呈 Ca2+濃度依賴性增大，當(dāng)CaCl2的濃度為3×10-3 mol/L時(shí)，Tmax為4.36±0.24（g）。用 HSYA（1×10-6～1×10-4 mol/L）孵育 20 min后，收縮曲線與對(duì)照組相比明顯下移，Tmax 減小。當(dāng) HSYA 濃度為1×10-5 mol/L和 1×10-4 mol/L時(shí)，Tmax 分別為3.32±0.22（g

9、）和 2.98±0.25（g）。 （4）HSYA 對(duì)血管作用的機(jī)制分析與對(duì)照組相比，HSYA（2×10-5 mol/L）組 Tmax和抑制率分別為4.31±0.37（g）和 10.95％，兩組間差異顯著；HP組 Tmax和抑制率分別為3.53±0.39（g）和 27.07％，HSYA+HP組 Tmax和抑制率3.62±0.41（g）和 25.21％，HP組和 HSYA+HP組與對(duì)照組組相比均差異顯著；HP組與 HSYA+HP組之

10、間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。RR組 Tmax和抑制率分別為3.95±0.41（g）和 19.39％；HSYA+RR組為3.42±0.34（g）和 28.10％，RR組與 HSYA+RR組對(duì)照組均差異顯著，RR組和 HSYA+RR組間差異顯著。 2.HSYA 對(duì) SHR 血壓的影響SHR 收縮壓和舒張壓在給藥前分別為168.5±11.4 mm Hg和132.6±9.1 mm Hg，靜脈注射 HSYA（20 mg/kg）20 min后收縮壓和舒

11、張壓開(kāi)始下降，90 min時(shí)血壓下降達(dá)到最大，收縮壓和舒張壓分別降到 141.3±10.1 mmHg和112.3±6.9 mm Hg，之后緩慢回升，4 h時(shí)基本恢復(fù)給藥前水平。靜脈注射 HSYA 后 WKY 收縮壓和舒張壓也有下降，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。HSYA 對(duì) SHR和 WKY 心率和心電無(wú)影響。 結(jié)論：HSYA 可降低 SHR 血壓，對(duì) KCl和 PE 引起血管收縮抑制作用可能是通過(guò)作用于鈣通道和阻斷 IP3 受體途徑實(shí)現(xiàn)的。