小鼠精子發(fā)生相關(guān)蛋白質(zhì)的初步分析.pdf

1、為了分離和鑒定與精子發(fā)生相關(guān)的蛋白質(zhì),該研究首先建立了運用雙向凝膠電泳和質(zhì)譜技術(shù)分離和鑒定小鼠睪丸蛋白質(zhì)的技術(shù)平臺.提取成年小鼠睪丸總蛋白,第一相電泳分別用不同長度的膠條進(jìn)行等電聚焦,然后用不同的檢測手段進(jìn)行檢測,以獲取最佳的分離條件;切取凝膠上的蛋白點,酶解后用質(zhì)譜分析得到其肽質(zhì)量指紋譜;數(shù)據(jù)庫檢索明確地鑒定了蛋白質(zhì).其次,為了分離與小鼠精子發(fā)生相關(guān)的蛋白質(zhì),我們應(yīng)用雙向凝膠電泳分離一周齡和七周齡小鼠睪丸蛋白提取液,經(jīng)計算機軟件圖像分

2、析和比較后,得到了49個在七周齡小鼠睪丸中高表達(dá)的蛋白點,然后用質(zhì)譜技術(shù)成功地鑒定了其中的22種蛋白質(zhì),其中有13種已被證實與精子發(fā)生相關(guān),其它9種蛋白質(zhì)在睪丸中未見相關(guān)報道,這些在小鼠睪丸不同發(fā)育階段差異表達(dá)的蛋白質(zhì)可能在精子發(fā)生中起重要作用.綜上所述,我們成功地建立了運用雙向凝膠電泳和質(zhì)譜技術(shù)分離和鑒定睪丸蛋白質(zhì)的技術(shù)平臺,并運用該技術(shù)平臺對不同發(fā)育階段的小鼠睪丸蛋白質(zhì)組進(jìn)行了分離和比較,鑒定了22個在成年小鼠睪丸高表達(dá)的蛋白質(zhì),為