小鼠皮膚移植模型中HLA-G小鼠同源類似物H2-Bl的表達研究.pdf

1、目的：建立小鼠皮膚移植模型，研究人類白細胞抗原-G(human leucocyte antigen-G，HLA-G)小鼠同源類似物H2-Bl在皮膚移植術(shù)后mRNA的表達變化規(guī)律及免疫抑制劑對其表達規(guī)律的影響，從而為HLA-G能否作為人類器官移植預(yù)后監(jiān)測指標提供實驗依據(jù)。
　　方法：將87只C57小鼠隨機分為：空白對照組、自身移植對照組和異體移植組，在異體移植組中又分為異體移植未用藥組、異體移植持續(xù)用藥組和異體移植短期用藥組。采用背

2、對背的皮膚移植方式構(gòu)建小鼠皮膚移植模型。在移植手術(shù)后的第1、2、3、7、10、15、21天，肉眼觀察移植皮片大體生存情況，同時取移植皮片進行病理學(xué)活檢，以病理結(jié)果為排斥標準；留取外周血和脾臟標本用RT-PCR技術(shù)檢測H2-BlmRNA的表達情況。實驗數(shù)據(jù)采用T檢驗（student’s t- test）進行多組間的兩兩比較。
　　結(jié)果：⑴自體移植組小鼠：移植皮膚生長情況良好，HE染色顯示未排斥，外周血細胞H2-Bl mRNA的表達與

3、空白對照組無顯著差異。⑵未用藥組：肉眼觀察術(shù)后第5-7天移植皮膚開始排斥，9-12天完全排斥，HE染色顯示移植皮片術(shù)后第7天出現(xiàn)中度排斥表現(xiàn)，第10天出現(xiàn)重度排斥或嚴重排斥表現(xiàn)；外周血細胞H2-Bl mRNA術(shù)后表達升高，第7天達到峰值后逐漸下降；脾臟細胞H2-Bl mRNA的表達術(shù)后逐步升高，與自體移植組差異顯著，第3天逐步下降，至第21天時與自體移植組無差異。⑶持續(xù)給藥組：肉眼觀察術(shù)后第17-18天移植皮片開始排斥，但在整個觀察期未

4、發(fā)生完全排斥，HE染色顯示術(shù)后小部分移植皮片第10天出現(xiàn)中度排斥表現(xiàn)，第15天出現(xiàn)重度排斥，但只有極個別出現(xiàn)嚴重排斥表現(xiàn)；外周血細胞H2-Bl mRNA的表達術(shù)后變化不顯著，第10天后升高，明顯高于自體移植組；脾臟細胞H2-Bl mRNA表達明顯升高，與自體移植組差異顯著，到第3天開始下降。⑷短期用藥組：術(shù)后第7天停止給藥，肉眼觀察術(shù)后第12-14天移植皮膚發(fā)生排斥，在第16-17天皮膚被完全排斥，HE染色顯示大部分移植皮片第10天出現(xiàn)

5、中度排斥表現(xiàn)，第15天出現(xiàn)重度排斥或嚴重排斥；外周血細胞H2-Bl mRNA的表達情況與持續(xù)用藥組結(jié)果相似，但術(shù)后第21天觀察點的表達低于持續(xù)用藥組；脾臟細胞H2-Bl mRNA的表達情況與持續(xù)用藥組結(jié)果相似，但隨著表達的下降，在第21天時已與自體移植組無顯著差異。⑸異體移植未用藥組與用藥組外周血細胞和脾臟細胞H2-BlmRNA的表達差異顯著。
　　結(jié)論：①模型鼠外周血H2-BlmRNA的表達變化與移植皮膚的排斥反應(yīng)發(fā)生在時相上同