MIF在EAE C57BL-6小鼠模型CNS的表達研究.pdf

1、目的：本研究觀察巨噬細胞移動抑制因子(MIF)在慢性EAE模型C57BL／6小鼠腦和脊髓中的動態(tài)表達變化，旨在探討MIF與EAE／MS發(fā)病的關系。 方法：72只SPF級6-8周健康雌性C57BL／6小鼠隨機分為空白對照組(20只)、佐劑組(20只)及：EAE模型組(32只)。模型組中發(fā)病小鼠又分為無癥狀期、發(fā)病初、發(fā)病高峰和慢性期組。用人工合成的mMOG35-55和完全弗氏佐劑免疫C57BL／6小鼠制成慢性EAE動物模型，每只小

2、鼠注射0.2ml，其中含人工合成的mMOG<,35-55>300ug,完全福氏佐劑2mg，分4點皮下注射，基礎免疫1周后用同樣劑量加強免疫一次；免疫當天和48小時后經(jīng)尾靜脈注射百日咳毒素O.5mg。免疫當天定為第O天起至第40天實驗終止前，每天8AM-8PM觀察動物行為活動，采用盲法，每天2人至少一次在同一時間稱體重并按Benson評分標準做EAE嚴重性的臨床評估，模型的成功與否主要根據(jù)Benson評分標準判定和病理學檢查，結合MRI結

3、果綜合評價；用免疫組化技術觀察空白對照組、佐劑對照組和模型組發(fā)病前、發(fā)病初、發(fā)病高峰和慢性期組腦和脊髓MIF的表達變化。 結果： 1．動物模型 慢性EAE模型累計成功率為83.3％，死亡率為8.3％，模型組在 第一次免疫后14-20天發(fā)病，20-28天達高峰，28-40天穩(wěn)定，發(fā)病小鼠體重明顯減輕；空白對照組和佐劑對照組體重呈增加趨勢，Benson標準評分為0分。發(fā)病小鼠HE和Weil氏髓鞘染色示小血管周

4、圍炎癥細胞浸潤和髓鞘脫失；1.5T頭部和脊髓掃描發(fā)現(xiàn)，EAE組病變在MRI冠狀切面，橫斷面T2加權像及水抑制像可見多個散在長T2高信號，但在T1加權像及脊髓信號不易辨認。 2.MIF的表達變化： 對照組小鼠腦和脊髓僅有低水平的MIF表達。mMOG35-55免疫C57BL／6小鼠誘導的慢性EAE模型小鼠在無癥狀期和發(fā)病初即可見CNS中MIF表達升高，急性期中表達最高，慢性期有下降，前后時相點相比均有差異性(P<0.05)，且與對