Ro25-6981對(duì)腦缺血大鼠海馬神經(jīng)損傷修復(fù)及神經(jīng)干細(xì)胞增殖影響的研究.pdf

1、目的: 研究Ro25-6981對(duì)成年大鼠短暫性前腦缺血再灌注海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞層神經(jīng)損傷修復(fù)和齒狀回顆粒下層（subgranular zone, SGZ）神經(jīng)干細(xì)胞增殖的影響，探討NMDA受體亞單位2B在其中的作用。
　　 方法: 健康成年雄性SD大鼠在進(jìn)行側(cè)腦室置管7d后，隨機(jī)分為正常組、假手術(shù)組和腦缺血再灌注組，每組又分別再分為Ro25-6981組和生理鹽水組。缺血再灌注組大鼠采用四動(dòng)脈阻斷前腦缺血再灌注模型，即缺血15

2、min再灌注1d、3d、7d、14d、21d、28d和35d，缺血前15min經(jīng)側(cè)腦室套管注射Ro25-6981或生理鹽水。各組大鼠均采用焦油紫染色顯示海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞構(gòu)筑及病理改變，采用免疫組織化學(xué)顯示海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞層GFAP、NSE陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)量的改變和SGZ區(qū)BrdU、nestin陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)量的改變，采用免疫熒光雙重標(biāo)記法檢測(cè)再灌7d時(shí)SGZ區(qū)BrdU/nestin雙標(biāo)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量的改變。結(jié)果使用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟

3、件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（mean±SD）表示，組間比較采用單因素方差分析，多個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)對(duì)照組比較采用最小顯著差法，實(shí)驗(yàn)組之間比較采用 t 檢驗(yàn)。以 P < 0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1、焦油紫染色結(jié)果顯示套管針道穿透皮質(zhì)及胼胝體進(jìn)入側(cè)腦室；
　　 2、焦油紫染色顯示，腦缺血再灌注生理鹽水組CA1區(qū)錐體細(xì)胞層再灌3d時(shí)出現(xiàn)明顯壞死，再灌注7d壞死達(dá)到高峰，壞死細(xì)胞胞體嚴(yán)重

4、固縮、深染，呈“米?！睜钌⒃诜植肌Ｈ毖敖o予Ro25-6981，可以減輕缺血造成的細(xì)胞壞死；
　　 3、腦缺血再灌注生理鹽水組海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞層NSE陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)量在再灌注7d時(shí)降低到最低值；缺血前給予Ro25-6981，基本上各時(shí)間點(diǎn)CA1區(qū)錐體細(xì)胞層NSE的表達(dá)量較腦缺血再灌注生理鹽水組均有所上升，其中7d和14d時(shí)增高明顯（P < 0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 4、與腦缺血再灌注生理鹽水組相比，腦缺血

5、再灌注Ro25-6981組各時(shí)間點(diǎn)海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞層GFAP陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)量均增多，且在再灌7d達(dá)到峰值（P < 0.01），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；
　　 5、腦缺血再灌注生理鹽水組SGZ區(qū)nestin陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)再灌1d開(kāi)始增多，7d時(shí)達(dá)到峰值，14d時(shí)急劇下降，至28d時(shí)降至正常水平；缺血前給予Ro25-6981，各時(shí)間點(diǎn)的nestin陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)均有所下降，其中在3d、7d和14d時(shí)減少明顯（P < 0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

6、意義；
　　 6、腦缺血再灌注生理鹽水組SGZ區(qū)BrdU陽(yáng)性細(xì)胞再灌1d開(kāi)始增殖，7d達(dá)到峰值，35d降至正常水平；缺血前給予Ro25-6981，各時(shí)間點(diǎn)的BrdU陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)均有所下降，其中在3d、7d、14d和21d時(shí)減少明顯（P < 0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；
　　 7、與腦缺血再灌注生理鹽水組相比，Ro25-6981可以降低腦缺血再灌7d海馬SGZ區(qū)的BrdU/nestin雙標(biāo)陽(yáng)性細(xì)胞密度（P < 0.05）