頭穴透刺對急性腦缺血大鼠內(nèi)源性神經(jīng)干細胞增殖分化影響的研究.pdf

1、目的：
　　 腦血管疾病具有發(fā)病率、致殘率與病死率均高的特點，其中缺血性腦血管疾病最為常見。大量的臨床和實驗研究表明，頭穴透刺治療本病具有較好的療效。腦梗死常造成患者神經(jīng)功能喪失，神經(jīng)元死亡不可避免，如何積極有效地促進腦梗死造成神經(jīng)功能缺失的恢復，是目前研究的熱點。本實驗采用改良線栓法制作大鼠局灶性腦缺血模型，運用頭穴透刺治療，并對大鼠神經(jīng)功能缺損進行評分，從內(nèi)源性神經(jīng)干細胞的增殖、分化方面探討頭穴透刺抗腦缺血損傷的作用機理。<

2、br>　　 方法：
　　 選用雄性SD大鼠64只，體重200～250g，隨機分為4組，即正常組、假手術組、腦缺血組與頭穴透刺組，每組各16只。采用改良線栓法復制大鼠大腦中動脈栓塞局灶性腦缺血模型，頭穴透刺組在造模成功，待動物模型清醒后1h，采用針刺治療，取百會透前頂、率谷透懸厘，接通G6805-Ⅱ型電針治療儀，選用疏密波，強度為1mA，頻率為2～15Hz，留針30min，每日治療1次，連續(xù)治療7日后，對大鼠神經(jīng)功能缺損進行評分

3、，運用免疫組化法檢測海馬齒狀回(HDG)神經(jīng)巢蛋白(Nestin)，RT-PCR檢測膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)mRNA、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)mRNA的表達。
　　 結(jié)果：
　　 1.大鼠經(jīng)栓塞右側(cè)大腦中動脈造成腦缺血后，均出現(xiàn)不同程度的行為異常，表現(xiàn)為不能完全伸展左側(cè)前爪，或出現(xiàn)向左側(cè)轉(zhuǎn)圈、傾倒等現(xiàn)象，表明造模成功。頭穴透刺組大鼠神經(jīng)功能缺損評分明顯改善。與腦缺血組比較，經(jīng)統(tǒng)計學處理，有極顯著性差異(t=3.

4、99，P＜0.01)。
　　 2.腦缺血組大鼠海馬齒狀回Nestin表達較正常組和假手術組明顯增加，經(jīng)統(tǒng)計學處理，具有極顯著性差異(P＜0.01)，提示模型大鼠腦缺血后，海馬齒狀回Nestin表達增加；與腦缺血組比較，頭穴透刺組海馬齒狀回Nestin陽性表達明顯增加，經(jīng)統(tǒng)計學處理，具有極顯著性差異(P＜0.01)。
　　 3.腦缺血組大鼠海馬GFAP mRNA表達較正常組和假手術組明顯增加，經(jīng)統(tǒng)計學處理，具有極顯著性差異

5、(P＜0.01)，提示模型大鼠腦缺血后，海馬GFAP mRNA表達增加；與腦缺血組比較，頭穴透刺組海馬GFAP mRNA表達明顯減少，經(jīng)統(tǒng)計學處理，具有極顯著性差異(P＜0.01)。
　　 4.腦缺血組大鼠海馬NSE mRNA表達較正常組和假手術組明顯減少，經(jīng)統(tǒng)計學處理，具有極顯著性差異(P＜0.01)，提示模型大鼠腦缺血后，海馬NSE mRNA表達減少；與腦缺血組比較，頭穴透刺組海馬NSE mRNA表達明顯增加，經(jīng)統(tǒng)計學處理，

6、具有極顯著性差異(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1.急性腦缺血后，大鼠海馬齒狀回Nestin表達增加，海馬GFAP mRNA表達明顯增加，海馬NSE mRNA表達明顯減少，表明Nestin、GFAP mRNA、NSE mRNA參與了急性腦缺血的病理過程。
　　 2.頭穴透刺可使急性腦缺血模型大鼠受損神經(jīng)功能明顯恢復，提示本法有顯著抗腦缺血損傷的作用。
　　 3.頭穴透刺能使腦缺血大鼠海馬齒狀回Ne