克班寧抗心肌缺血的實(shí)驗(yàn)研究及一般藥理學(xué)研究.pdf

1、云南昆明 650200克班寧(Crebanin,Cre)主要存在于防己科千金藤屬(Stephania,Ste)的部分植物中,屬異喹啉類阿樸菲型(aporphine)生物堿。對(duì)Cre的前期研究表明：Cre為單體,有效成分明確,藥效學(xué)顯示Cre具有多種藥理活性<'[1-4]>,靜脈給藥能降低結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈所致心律失常發(fā)生率和持續(xù)時(shí)間；能明顯地推遲大鼠心肌缺血再灌注損傷所致心律失常發(fā)生的時(shí)間,并縮短心律失常的持續(xù)時(shí)間；Cre能縮短在缺血期間

2、I/R的評(píng)分值；Cre可使心肌MDA含量明顯降低,同時(shí)使心肌組織SOD、GSH.PX活性明顯升高；能縮小心肌缺血范圍及梗死面積。本課題旨在改變給藥途徑,從抗心肌缺血的角度進(jìn)一步探討克班寧對(duì)心血管的作用,探討其作為抗心肌缺血藥的可行性；同時(shí)對(duì)Cre不同給藥途徑的安全性進(jìn)行評(píng)價(jià)。 目的：探討Cre口服給藥途徑的抗心肌缺血作用及可能的機(jī)制,評(píng)價(jià)不同給藥途徑的安全性,進(jìn)一步開發(fā)異喹啉類化合物在心血管疾病方面的應(yīng)用。 方法：口服

3、灌胃Cre采用Bliss法求出小鼠灌胃給藥的LD50；采用皮下注射異丙腎上腺素(Iso)增加小鼠心肌耗氧,以普萘洛爾(Pro)為陽(yáng)性對(duì)照,生理鹽水(NS)為陰性對(duì)照,口服給藥觀察Cre5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg三個(gè)劑量,一次給藥,及連續(xù)7天給藥對(duì)小鼠常壓耐缺氧的影響；采用異丙腎上腺素(Iso)造成急性小鼠心肌缺血模型,設(shè)立克班寧組(Cre,10mg/kg)、陽(yáng)性對(duì)照組(普萘洛爾)、模型組、正常組,觀察小鼠心肌病理改變；

4、采用異丙腎上腺素所致大鼠急性心肌缺血模型,設(shè)立克班寧組(Cre,10mg/kg)、陽(yáng)性對(duì)照組(普萘洛爾)、模型組,口服給藥觀察大鼠給藥前后及組間心肌缺血心電圖的變化,并在描記心電后測(cè)定大鼠血清SOD、MDA及NO的活性；采用垂體后葉素(Pit)造成大鼠急性心肌缺血模型,設(shè)立克班寧組(Cre,10mg/kg)、陽(yáng)性對(duì)照組(硝酸甘油)、模型組,口服給藥觀察大鼠給藥前后及組間心肌缺血心電圖的變化,并在描記心電后測(cè)定大鼠血小板聚集率；采用靜脈給

5、藥方式,設(shè)立克班寧5mg/kg、2.5mg/kg、1.25mg/kg三個(gè)劑量組及陰性對(duì)照組(5﹪葡萄糖),觀察Cre對(duì)中樞系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)的影響。 結(jié)果： 1、Cre的急性毒性試驗(yàn)：小鼠灌胃給藥后,用B1iss法求得Cre灌胃給藥途徑LDso約為70.32±0.02mg/kg,LD<,50>的95﹪可信區(qū)間為63.20～78.25mg/kg。 2、Cre對(duì)Iso增加小鼠心肌耗氧存活時(shí)間的影響:與NS組比較,普萘

6、洛爾(Pro,13mg/kg)組小鼠的耐缺氧生存時(shí)間明顯延長(zhǎng),經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理差異具有非常顯著性意義(P<0.01)；Cre高劑量(20mg/kg)1天組與NS組比較差異具有顯著性意義(P<0.05),Cre中劑量(10mg/kg)7天組0.050.05)。 3、Cre對(duì)Iso所致小鼠急性心肌缺血模型心肌細(xì)

7、胞的病理組織學(xué)影響:從病理切片來(lái)看,正常對(duì)照組心肌細(xì)胞形態(tài)正常；模型組心肌細(xì)胞水腫變性伴充血；Pro組部分心肌細(xì)胞水腫變性；Cre7天組部分心肌細(xì)胞水腫變性。 4、Cre對(duì)Iso所致急性心肌缺血模型大鼠的影響：從心電圖觀察,同模型組相比,Cre對(duì)lso造成的心肌缺血的對(duì)抗作用不明顯,雖有延緩心肌發(fā)生嚴(yán)重缺血的趨勢(shì),經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理差異無(wú)顯著性意義(P>0.05)；但可以明顯推遲因缺血導(dǎo)致的心律失常發(fā)生時(shí)間,并減少心律失常發(fā)生率(P<

8、0.01)。 5、Cre對(duì)Iso所致急性心肌缺血模型大鼠血清SOD、MDA及No活性的影響:同模型組相比Pro組及Cre組血清中SOD活性顯著升高,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理差異具有顯著性意義(P<0.05)；同模型組相比Pro組及Cfe組血清中MDA含量雖稍有下降,但經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理差異無(wú)顯著性意義；與模型組比較Pro組及Cre組血清中NO含量雖有升高趨勢(shì),但經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理差異無(wú)顯著性意義(P>0.05)。 6、Cre對(duì)Pit所致急性心肌

9、缺血模型大鼠的影響:同模型組比較,Cre對(duì)Pil造成大鼠急性心肌缺血的對(duì)抗作用不明顯；經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理差異無(wú)顯著性意義(P>0.05)。 7、Cre對(duì)Pit所致急性心肌缺血模型大鼠血小板聚集的影響:同模型組比較,硝酸甘油組及Cre組大鼠血漿血小板的聚集率在統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異無(wú)顯著性意義(P>0.05)。 8、Cre靜脈給藥對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響:同對(duì)照組比較,Cre各劑量組對(duì)小鼠的步態(tài)、肌緊張等一般行為無(wú)影響(P>0.05)；Cre

10、能計(jì)量依賴性增加小鼠翻正反射消失例數(shù),經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理差異具有非常顯著性意義(P<0.01)；Cre高、中劑量組能明顯減少小鼠自主活動(dòng)次數(shù)(P<0.01),低劑量組自主活動(dòng)雖然有減少的趨勢(shì),經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理差異無(wú)顯著性意義(P>0.05)。 9、Cre靜脈給藥對(duì)大鼠心血管系統(tǒng)的影響：實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,各組動(dòng)物給藥后30秒,克班寧能明顯降低大鼠的收縮壓、舒張壓、平均動(dòng)脈壓及減慢心率,與對(duì)照組相比,差異有非常顯著性意義(P<0.05,P<0.0

11、1),且在給藥后1min,只有Cre5mg/kg對(duì)大鼠的舒張壓和平均動(dòng)脈壓有明顯影響,與對(duì)照組相比有顯著性意義(P<0.05),在給藥后5min、10min及20min對(duì)血壓及心率無(wú)明顯影響；對(duì)大鼠心電圖研究結(jié)果表明,在給藥20min后克班寧對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物心電圖各指標(biāo)都無(wú)明顯影響。 結(jié)論： 1、Cre口服給藥具有一定毒性,毒性小于靜脈給藥,LD<,50>約為70.32±0.02mg/kg,安全范圍較靜脈給藥明顯提高；

12、 2、Cre20mg/kg1次口服預(yù)防性給藥可延長(zhǎng)Iso增加心肌耗氧小鼠的常壓耐缺氧存活時(shí)間； 3、Crelomg/kg連續(xù)7天口服預(yù)防性給藥對(duì)Iso所致急性心肌缺血小鼠的心肌細(xì)胞有一定的保護(hù)作用； 4、Crelomg/kg連續(xù)7天口服預(yù)防性給藥可減少Iso所致急性心肌缺血所引發(fā)的大鼠心律失常的發(fā)生率； 5、Crelomg/kg連續(xù)7天口服預(yù)防性給藥可提高Iso所致急性心肌缺血大鼠血清SOD活性； 6、C

13、relomg/kg連續(xù)7天口服預(yù)防性給藥對(duì)垂體后葉素所致急性心肌缺血模型大鼠心肌缺血的發(fā)生無(wú)明顯對(duì)抗作用； 7、Crelomg/kg連續(xù)7天口服預(yù)防性給藥對(duì)大鼠體內(nèi)血小板聚集無(wú)明顯影響； 8、Cre在1.25-5mg/kg劑量范圍內(nèi)靜脈給藥對(duì)小鼠的步態(tài)、肌緊張等一般行為無(wú)影響； 9、Cre在1/25-5mg/kg劑量范圍內(nèi)靜脈給藥可增強(qiáng)戊巴比妥鈉閾下劑量對(duì)小鼠的催眠作用,并且具有一定的鎮(zhèn)靜作用； 10、C