兒童乳牙根生理性吸收不同時期破牙細(xì)胞表達(dá)RANKL和TRAF6的研究.pdf

1、目的：①建立離體乳牙生理性吸收脫鈣模型，為研究兒童乳牙根生理性吸收不同時期相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)提供實驗基礎(chǔ)。②觀察核因子(K)受體活化劑配體（receptor activator of nuclear factor kappa B ligand，RANKL）和腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(tumor necrosis factor receptor associated factors 6，TRAF6)在兒童乳牙根生理性吸收過程中的表達(dá)，為

2、進(jìn)一步探索RANKL和TRAF6在兒童乳恒牙替換過程中的作用機(jī)理增添新的實驗資料。
　　 方法：①收集兒童乳牙根生理性吸收期的乳前牙和因正畸拔除的前磨牙，按照牙根吸收分期標(biāo)準(zhǔn)分為吸收早期、吸收中期和吸收晚期三個實驗組，因正畸拔除的前磨牙作為對照組，置于中性福爾馬林溶液固定，然后將固定好的標(biāo)本置于15％EDTA溶液，超聲輔助脫鈣，建立穩(wěn)定的離體乳牙生理性吸收脫鈣模型。②將脫鈣成功后的標(biāo)本，自牙根向牙冠沿牙體中線通過髓腔切5μm連續(xù)

3、切片，運用免疫組織化學(xué)的方法檢測兒童乳牙根生理性吸收過程中牙髓成纖維細(xì)胞，成牙本質(zhì)細(xì)胞以及破牙細(xì)胞胞漿表達(dá)RANKL和TRAF6，然后使用醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)對實驗結(jié)果進(jìn)行圖像分析，運用SPSS17.0統(tǒng)計分析軟件分別對實驗組的成牙本質(zhì)細(xì)胞，牙髓成纖維細(xì)胞和破牙細(xì)胞以及對照組的成牙本質(zhì)細(xì)胞和牙髓成纖維細(xì)胞的光密度值進(jìn)行one-wayANOVA檢驗，檢驗水準(zhǔn)a=0.05，比較各組間組內(nèi)差異。
　　 結(jié)果：免疫組織化學(xué)結(jié)果
　　

4、 實驗一：實驗組：RANKL蛋白在兒童乳恒牙替換過程中破牙細(xì)胞、牙髓成纖維細(xì)胞和牙髓成牙本質(zhì)細(xì)胞胞漿中染色陽性，吸收中期組累及光密度值高于吸收早期和吸收晚期組具有統(tǒng)計學(xué)差異。同組實驗中破牙細(xì)胞與成牙本質(zhì)細(xì)胞、牙髓成纖維細(xì)胞累及光密度值比較P＜O.01具有統(tǒng)計學(xué)差異；而成牙本質(zhì)細(xì)胞與牙髓成纖維細(xì)胞間累及光密度值比較P＞0.05，不具有統(tǒng)計學(xué)差異。對照組：成牙本質(zhì)細(xì)胞、牙髓成纖維細(xì)胞染色均為陰性，未觀察到破牙細(xì)胞存在。
　　 實驗二

5、：實驗組：連接蛋白TRAF6在兒童乳恒牙替換過程中破牙細(xì)胞、牙髓成纖維細(xì)胞和牙髓成牙本質(zhì)細(xì)胞胞漿中染色陽性，吸收中期組TRAF6累及光密度值高于吸收早期和吸收晚期組具有統(tǒng)計學(xué)差異。同組實驗中破牙細(xì)胞與成牙本質(zhì)細(xì)胞，牙髓成纖維細(xì)胞累及光密度值比較P＜O.01具有統(tǒng)計學(xué)差異；而成牙本質(zhì)細(xì)胞與牙髓成纖維細(xì)胞間累及光密度值比較P＞0.05.不具有統(tǒng)計學(xué)差異。對照組：成牙本質(zhì)細(xì)胞、牙髓成纖維細(xì)胞染色均為陰性，未觀察到破牙細(xì)胞存在。
　　

6、結(jié)論：1.兒童乳牙根生理性吸收過程中破牙細(xì)胞表達(dá)RANKL免疫組織化學(xué)染色為陽性，推測RANKL可能通過自身調(diào)節(jié)參與自身的分化和功能活性，引起乳牙根的吸收。破牙細(xì)胞RANKL累及光密度值在乳牙根吸收中期組高于早期組和晚期組。提示RANKL在乳牙根吸收中期表達(dá)最強(qiáng)，破牙細(xì)胞功能最為活躍。2.兒童乳牙根吸收陷窩內(nèi)破牙細(xì)胞表達(dá)TRAF6免疫組織化學(xué)染色為陽性，提示TRAF6可能參與該細(xì)胞的分化和功能活性，引起乳牙根的吸收。破牙細(xì)胞TRAF6累