正常皮膚、瘢痕疙瘩和不同時(shí)期增生性瘢痕中巨噬細(xì)胞分布的比較研究.pdf

1、目的:目前病理性瘢痕的形成機(jī)制還沒(méi)有定論,也缺乏有效治療病理性瘢痕的方法,但是越來(lái)越多的研究提示巨噬細(xì)胞在創(chuàng)傷修復(fù)過(guò)程中發(fā)揮重要作用,巨噬細(xì)胞的數(shù)量和功能的異常與病理性瘢痕形成有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)免疫組織化學(xué)方法應(yīng)用鼠抗人巨噬細(xì)胞單克隆抗體CD68檢測(cè)正常皮膚、瘢痕疙瘩和不同時(shí)期增生性瘢痕中的巨噬細(xì)胞,比較研究正常皮膚、瘢痕疙瘩和不同時(shí)期增生性瘢痕中巨噬細(xì)胞分布位置和數(shù)量的差異。
　　方法:收集臨床病理性瘢痕切除手術(shù)后標(biāo)本17例,分為

2、A、B、C、D三組(分組依據(jù)見(jiàn)后文):A組瘢痕疙瘩,B組增生性瘢痕(增生時(shí)間小于6個(gè)月),C組增生性瘢痕(增生時(shí)間6～12個(gè)月),D組成熟性瘢痕(增生性瘢痕成熟期,增生時(shí)間大于8年)。另取正常皮膚標(biāo)本3例作為對(duì)照(E組)。將所取標(biāo)本于10％的中性福爾馬林中固定12h后,常規(guī)梯度酒精脫水,浸蠟包埋切片,分別做蘇木精-伊紅(HE)染色和免疫組織化學(xué)染色。用鼠抗人巨噬細(xì)胞單克隆抗體CD68染色后的巨噬細(xì)胞陽(yáng)性信號(hào)為黃色或棕黃色顆粒。巨噬細(xì)胞圖

3、像分析方法:在400倍顯微鏡下分別觀察各組呈棕黃色或黃色的巨噬細(xì)胞陽(yáng)性顆粒個(gè)數(shù),并進(jìn)行計(jì)數(shù)。每張切片觀察5個(gè)視野取其均數(shù)進(jìn)行比較(同一人在同一臺(tái)顯微鏡相同放大倍數(shù)下觀察計(jì)數(shù))。
　　結(jié)果:一. HE染色光鏡下組織形態(tài):①正常皮膚組表皮透明層與角質(zhì)層相對(duì)較厚;真皮乳頭突出明顯,乳突數(shù)目較多;網(wǎng)織層見(jiàn)成纖維細(xì)胞附著,核小,著色深,細(xì)胞質(zhì)少,數(shù)目較少。②瘢痕疙瘩組織表皮萎縮,基底層、棘層細(xì)胞胞體大,層數(shù)增加,相對(duì)層數(shù)較多;顆粒層、透明層

4、與角質(zhì)層僅見(jiàn)較薄的嗜酸性染色層,無(wú)法區(qū)分;真皮乳頭可見(jiàn),乳突數(shù)目少,低平;網(wǎng)織層厚,致密,見(jiàn)粗大的膠原,染色深,排列紊亂,有玻璃樣變性,并可見(jiàn)血管、淋巴管,毛細(xì)血管閉鎖;成纖維細(xì)胞兩層均見(jiàn),數(shù)目多。③增生性瘢痕組表皮基底層和棘層細(xì)胞相對(duì)層數(shù)較多,其細(xì)胞間連接較正常皮膚顯得松散;透明層與角質(zhì)層變薄明顯;真皮乳頭突出度較正常皮膚低矮,較平,數(shù)目較正常皮膚減少;網(wǎng)織層較厚,較致密,并可見(jiàn)血管、淋巴管,毛細(xì)血管擴(kuò)張;成纖維細(xì)胞兩層均見(jiàn),數(shù)目多。

5、④成熟性瘢痕表皮矮柱狀的基底層細(xì)胞和真皮相連接,附著于基底膜,其相對(duì)層數(shù)相對(duì)增生性瘢痕較少;其細(xì)胞間連接較正常皮膚顯得松散。顆粒層細(xì)胞呈較扁的梭形,較正常皮膚明顯變薄;透明層與角質(zhì)層變薄明顯。真皮乳頭層較疏松,染色較淡,其下為網(wǎng)織層,較增生性瘢痕和瘢痕疙瘩薄,較致密,見(jiàn)粗大的膠原,染色深,較不規(guī)則,并可見(jiàn)毛細(xì)血管閉鎖。二.巨噬細(xì)胞免疫組化圖像分析:各病理性瘢痕組織中巨噬細(xì)胞陽(yáng)性顆粒數(shù)明顯高于正常皮膚組,相比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)

6、。瘢痕疙瘩組與增生時(shí)間小于6個(gè)月組之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。瘢痕疙瘩組與增生時(shí)間大于8年組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。增生期瘢痕與成熟期瘢痕組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。瘢痕疙瘩組與增生時(shí)間6～12個(gè)月組之間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。增生性瘢痕小于6個(gè)月組與6～12個(gè)月組之間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論:與正常皮膚相比,巨噬細(xì)胞在瘢痕疙瘩和不同時(shí)期增生性瘢痕中存在著分布位置和數(shù)量的異常,