Survivin、VEGF-C、CyclinD1、CDC25A和PCNA在膽管癌中的表達及意義的研究.pdf

1、目的：通過檢測Survivin、VEGF-C、CyclinD1、CDC25A和PCNA在膽管癌中的表達，探討其在膽管癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其機制，為膽管癌診斷和治療尋找新的靶點。 方法: 1.實驗標本采取膽管癌組織、相同個體癌旁膽管組織及其正常膽管組織 1.1采用免疫組化過氧化物酶標記鏈霉卵白素法(SP)對42例膽管癌組織及20例正常組織中Survivin、VEGF-C及PCNA蛋白進行檢測并結合患者的年齡、性別以

2、及腫瘤大小、部位、分化程度、淋巴結轉移等臨床病理因素進行綜合分析。所取的標本均通過病理學診斷證實。 1.2采用流式細胞術檢測42例膽管癌和20例正常膽管組織的CyclinD1、CDC25A蛋白的表達，其中蛋白的表達量用平均熒光強度(均道值)來表示。所取的標本均通過病理學診斷證實1.3采用RT-PCR方法檢測42例術中所取的新鮮的膽管癌組織、17例同個體癌旁膽管組織和20例正常膽管組織中Survivin、VEGF-C、Cyclin

3、D1、CDC25A及PCNA的mRNA表達，術中所取的標本均通過病理學診斷證實。經Gel-proanalyzer3.1軟件分析RT-PCR產物的光密度(optical density,OD)，計算Survivin、VEGF-C、CyclinD1、CDC25A及PCNA的OD值與內參照基因(glyceraldehyde-3-phosphatedehvdrogenase,GADPH)OD值的比值，作為目的基因產物mRNA的相對含量。

4、 2.應用The SAS System for Windows v6.12軟件進行統(tǒng)計學處理。實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(-x±s)表示，不同組別實驗數(shù)據(jù)比較采用方差分析(ANOVA)，進一步兩兩比較采用t檢驗(LSD法)；免疫組化結果采用卡方檢驗；均以a=0.05為檢驗水準，當P<0.05時具有統(tǒng)計學意義。 結果： 1.用免疫組化檢測42例膽管癌組織及其20例正常膽管組織Survivin、VEGF-C及PCNA的蛋白的表

5、達情況膽管癌組織、正常膽管組織中Survivin表達的陽性率分別為78.57％和25.00％，膽管癌組織的陽性率明顯高于正常組織；膽管癌組織、正常膽管組織中VEGF-C表達的陽性率分別為83.33％和30.00％，膽管癌組織的陽性率明顯高于正常組織；膽管癌組織、正常膽管組織中PCNA表達的陽性率分別為71.19％和25.00％，膽管癌組織的陽性率亦明顯高于正常組織。 2.用流式細胞術檢測42例膽管癌組織及20例正常膽管組織Cyc

6、linD1和CDC25A的蛋白的表達情況膽管癌組織、正常膽管組織中CyclinD1蛋白表達分別為530.253±27.823、497.416±38.019，膽管癌組織的CyclinD1蛋白表達高于正常組織；膽管癌組織、正常膽管組織中CDC25A蛋白表達分別為534.029±35.674，497.276±42.343，膽管癌組織的CDC25A蛋白表達高于正常組織。 3.用RT-PCR方法檢測42例膽管癌組織、17例相同個體癌旁膽管

7、組織及其20例正常膽管組織中Survivin、VEGF-C、CyclinD1、CDC25A及PCNA的mRNA表達情況膽管癌組織、同種個體癌旁組織及正常膽管組織中Survivin mRNA相對表達量分別為0.6238±0.080、0.5693±0.0443和0.5684±0.0317，Survivin mRNA在三組之間的表達呈下降趨勢；膽管癌組織、同種個體癌旁組織及正常膽管組織中VEGF-C mRNA相對表達量分別為0.6930±0.

8、1078、0.6270±0.0664和0.6105±0.0577，VEGF-CmRNA在三組之間的表達呈下降趨勢；膽管癌組織、同種個體癌旁組織及正常膽管組織中CyclinD1 mRNA相對表達量分別為0.6288±0.0942、0.5608±0.0577和0.5845±0.0310，CyclinD1 mRNA在三組之間的表達呈下降趨勢；膽管癌組織、同種個體癌旁組織及正常膽管組織中CDC25A mRNA相對表達量分別為0.5937±0.0

9、716、0.5229±0.0575和0.5135±0.0780，CDC25A mRNA在三組之間的表達呈下降趨勢；膽管癌組織、同種個體癌旁組織及正常膽管組織中PCNAmRNA相對表達量分別為0.6303±0.0773、0.5692±0.0408和0.5605±0.0331，PCNA mRNA在三組之間表達也呈下降趨勢。 結論： Survivin、VEGF-C、CyclinD1、CDC25A及PCNA mRNA和蛋白在膽管