膽管癌微血管計數(shù)和VEGF、VEGF受體及核因子kB的表達(dá)及意義.pdf

1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文膽管癌微血管計數(shù)和VEGF、VEGF受體及核因子kB的表達(dá)及意義姓名：沈波申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：外科學(xué)（普外科）指導(dǎo)教師：蔡秀軍20040501浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文評價該腫瘤良惡性程度、預(yù)測預(yù)后的手段，為進(jìn)一步研究膽管癌的發(fā)生、發(fā)展機(jī)理阻及尋找新的治療手段提供一定的理論基礎(chǔ)。材料和方法選取浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬邵逸夫醫(yī)院和浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院1997年10月至2003年11月期間手術(shù)治療的膽管癌病例50例。其中肝

2、門部膽管癌3l例，中段膽管癌6例，下段膽管癌13例?；颊咧心行?7例，女性23例，年齡自32、84歲，平均年齡593歲。手術(shù)方式為：根治陛切除術(shù)27例，姑息性切除術(shù)23例。所有標(biāo)本均經(jīng)病理學(xué)證實，其中高分化腺癌19例，中分化腺癌2l例，低分化腺癌lO例；伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移13例；伴有神經(jīng)浸潤22例：伴有胰腺浸潤14例。對照取自9例肝移植供體。實驗分組：取9例肝移植供體的膽管標(biāo)本作為正常組織：癌旁組織取自27例根治性切除標(biāo)本的切緣；腫瘤組織取

3、自50例膽管癌的手術(shù)切除標(biāo)本。隨訪：通過電話調(diào)查、信訪調(diào)查，結(jié)合門診隨訪的方式了解27例接受根治勝手術(shù)治療的膽管癌患者自手術(shù)之日起至2004年3月20日是否存活、存活時間及其死亡原因。采用免疫組化EnVision二步法檢測微血管密度(MVD)、VEGF。、VEGFR一2(Flk—l／KDR)、NFkBp65的表達(dá)。結(jié)果判斷：l、CD34陽性判斷及MVD測定，血管內(nèi)皮細(xì)胞被染成棕黃色，以與背景明顯有別的任何一個染色的內(nèi)皮細(xì)胞或細(xì)胞群作為一

4、個血管。先在低倍鏡下(10X10)尋找血管最高密度區(qū)(hotspot)，然后在高倍鏡下(10X40)計數(shù)5個血管最高密度區(qū)的微血管數(shù)，取均值代表MVD。2、VEGF。。j、Flk一1／KDR和NF—kBp65陽性結(jié)果判斷，陽性表達(dá)為細(xì)胞胞漿染成棕黃色，高倍鏡下(10X40)取5個不同視野，每個視野計數(shù)100個細(xì)胞，將陽性細(xì)胞的百分率和染色強(qiáng)度分別計分。具體計分標(biāo)準(zhǔn)如下：(1)陽性細(xì)胞的百分率75％4分。(2)陽性細(xì)胞的染色強(qiáng)度為無染色O