丹參等中藥材化學(xué)成分分離純化方法研究.pdf

1、中醫(yī)藥是中華民族的寶貴財(cái)富，在醫(yī)療保健等方面有著獨(dú)特的功效。但是中藥的成分十分復(fù)雜，有效成分的含量比較低而且純化困難，使其在藥理研究和臨床應(yīng)用上受到了很大的限制，因此建立一種快速分離中藥有效成分的方法尤為重要。
　　本文建立了丹參、草豆蔻藥材有效成分的超臨界流體色譜（SFC）分離純化方法和陳皮、前胡藥材有效成分的制備型高效液相色譜（PHPLC）分離純化方法，運(yùn)用高效液相色譜（HPLC）對(duì)所得單體進(jìn)行純度分析，利用紫外光譜（UV）、

2、核磁共振光譜（NMR）和質(zhì)譜（MS）對(duì)單體的化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定，以期為該類藥物的開發(fā)應(yīng)用提供參考。
　　一、超臨界流體色譜分離純化丹參中5種丹參酮成分
　　實(shí)驗(yàn)首先用90％乙醇對(duì)丹參藥材進(jìn)行粗提取，得到丹參粗提物，再利用SFC對(duì)粗提物進(jìn)行分離純化研究，分別考察了色譜柱、改性劑、流速、溫度、壓力對(duì)丹參中5種丹參酮分離過(guò)程的影響，確定了比較適宜的色譜條件。然后在分析型SFC的基礎(chǔ)上通過(guò)色譜放大公式得到了制備型SFC色譜分離的條件，

3、通過(guò)SFC得到的單體，利用HPLC進(jìn)行純度測(cè)定，利用UV、NMR進(jìn)行結(jié)構(gòu)的鑒定。同時(shí)對(duì)該色譜過(guò)程的熱力學(xué)規(guī)律進(jìn)行了初步研究，說(shuō)明了在此條件下丹參中丹參酮類成分的色譜分離過(guò)程為焓控過(guò)程。
　　二、超臨界流體色譜分離純化草豆蔻中4種主要有效成分
　　實(shí)驗(yàn)首先用70%乙醇對(duì)草豆蔻主要有效成分進(jìn)行提取，再用SFC對(duì)粗提物進(jìn)行分離純化研究，分別考察了色譜柱、改性劑、流速等對(duì)分離過(guò)程的影響，通過(guò)比較其有效成分在色譜柱上的保留行為，得到分

4、離草豆蔻有效成分的最優(yōu)條件。然后通過(guò)色譜放大公式在分析型SFC色譜條件的基礎(chǔ)上得到了制備型SFC色譜分離的條件，由SFC得到的單體，經(jīng)UV和NMR鑒定其結(jié)構(gòu)，HPLC檢測(cè)純度。同時(shí)研究了該色譜過(guò)程的熱力學(xué)規(guī)律，說(shuō)明在此條件下草豆蔻4種主要有效成分的色譜分離過(guò)程為焓控過(guò)程。
　　三、制備高效液相色譜分離純化陳皮中5種黃酮類成分
　　實(shí)驗(yàn)首先對(duì)陳皮藥材進(jìn)行了粗提取，使用85%乙醇提取、乙酸乙酯萃取將陳皮中的黃酮成分分為水溶性和脂

5、溶性兩部分，并對(duì)這兩部分分別建立了PHPLC分離純化方法，通過(guò)優(yōu)化分離條件，確定了適宜的色譜條件。結(jié)果從陳皮粗提物中分離得到5種黃酮類成分，經(jīng)UV、NMR及MS鑒定分別為橙皮苷、柚皮苷、川陳皮素、3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黃酮和橘皮素。
　　四、制備高效液相色譜分離純化前胡中3種香豆素成分
　　采用制備型高效液相色譜技術(shù)，從前胡提取液中分離出高純度的香豆素類活性物質(zhì)。采用C18柱(250 mm×25.4 mm