丹皮酚對(duì)血管成形術(shù)后內(nèi)膜增生及血管重塑的影響.pdf

1、目的：
　　采用球囊損傷腹主動(dòng)脈結(jié)合高脂喂養(yǎng)的方法建立兔動(dòng)脈粥樣硬化(AS)模型,再行球囊擴(kuò)張術(shù)建立兔血管成形術(shù)(PTA)后再狹窄(RS)模型,術(shù)后予丹皮酚(Paeonol,Pae)干預(yù),觀察丹皮酚對(duì)血管成形術(shù)后再狹窄的作用并探討其機(jī)制。
　　材料與方法：
　　普通級(jí)成年雄性新西蘭大白兔40只,體重(2.5士3.0)kg,隨機(jī)取其中6只予普通飼料喂養(yǎng)并行假手術(shù)作為假手術(shù)陰性對(duì)照組,其余予高脂喂養(yǎng)8周,同時(shí)行腹主動(dòng)脈球囊

2、損傷術(shù)剝脫血管內(nèi)皮,建立兔動(dòng)脈粥樣硬化模型。8周后從球囊損傷術(shù)后兔中隨機(jī)選取6只處死、取材,同時(shí)將假手術(shù)組6只兔處死,取材,兩組比較證明動(dòng)脈粥樣硬化建模成功。之后行球囊擴(kuò)張術(shù),建立血管成形術(shù)后再狹窄模型。在喂養(yǎng)及術(shù)中共死亡4只兔,余24只分為四組,每組6只,分別為模型組(生理鹽水2ml/kg·d+普通飼料)、低劑量丹皮酚組(丹皮酚75mg/kg·d+普通飼料)、高劑量丹皮酚組(150mg/kg·d+普通飼料)、纈沙坦組(10mg/kg·

3、d+普通飼料),灌胃4周后,處死動(dòng)物、取材、切片。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:①切片行HE、Masson染色;②mmp-2、bcl-2采用免疫組化染色;③細(xì)胞凋亡行原位雜交(TUNEL法)染色。圖像分析:①對(duì)HE、Masson染色片進(jìn)行血管形態(tài)計(jì)量分析;②免疫組化和凋亡染色片予計(jì)數(shù)單個(gè)視野內(nèi)陽(yáng)性細(xì)胞占視野內(nèi)全部細(xì)胞百分比衡量其各自的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.血管形態(tài)學(xué)分析結(jié)果:模型組可見血管內(nèi)膜明顯增生,管腔狹窄,大量膠原纖維增生。用藥組與

4、模型組相比,內(nèi)膜增生明顯受抑制,內(nèi)膜面積(IA)減少,管腔面積(LA)增大,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),同時(shí)發(fā)現(xiàn)用藥組較模型組膠原增生減少,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。兩組Pae組(高Pae組與低Pae組)與纈沙坦組相比,上述各指標(biāo)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。中膜面積,兩組Pae組與模型組相比,無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。兩組Pae組與纈沙坦組相比,有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。低Pae組與高Pae組相比,二者

5、差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。同時(shí)各用藥組LA變化值較對(duì)應(yīng)IA變化值明顯增大,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　2.TUNEL染色細(xì)胞凋亡圖像分析結(jié)果:模型組凋亡細(xì)胞散在分布,數(shù)量較少,用藥組與模型組相比,凋亡細(xì)胞明顯增多,多集中于血管內(nèi)膜,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。但低Pae組與高Pae組相比,二者無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),同時(shí)兩組Pae組與纈沙坦組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　

6、　3.mmp-2、bcl-2免疫組化圖像分析:模型組mmp-2及bcl-2陽(yáng)性細(xì)胞主集中于內(nèi)膜靠近管腔側(cè),分布較多,用藥組分別與模型組相比,陽(yáng)性細(xì)胞分布明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。但低Pae組與高Pae組相比,二者無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),同時(shí)兩組Pae組與纈沙坦組相比,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.丹皮酚通過(guò)抑制膠原的過(guò)度沉積,抑制PTA術(shù)后內(nèi)膜增厚及血管重塑的發(fā)生。