鄰苯二甲酸二異壬酯孕期染毒引起大鼠胎兒睪丸發(fā)育不全的研究.pdf

1、鄰苯二甲酸二異壬酯(DINP)是一種由苯酐和異壬醇酯化反應而得的常用增塑劑，廣泛用于聚氯乙烯聚合物(PVC)等塑料產(chǎn)品中，代替了由于生殖毒性而禁止使用其它增塑劑來合成的塑料消費產(chǎn)品。某些鄰苯二甲酸鹽若在孕期染毒，會造成胎兒時期睪丸發(fā)育不全的相關綜合征。但是，DINP對胎兒時期Leydig細胞的發(fā)育是否有影響尚不清楚。
　　目的：
　　調(diào)查DINP對大鼠胎兒的胎兒型睪丸Leydig細胞功能和睪丸發(fā)育的影響。
　　方法：<

2、br>　　對雌性妊娠Sprague Dawley(SD)大鼠從孕期(GD)第12-21天分別灌胃給予10、100、500或1000毫克/千克(mg/kg)的DINP和玉米油（溶媒對照）。GD21.5天，即在仔鼠出生第一天，處死仔鼠。測量母鼠GD0天、GD11天和分娩后的體重;測量雄仔鼠的肛殖距(AGD)及雄仔鼠的體重;取出雄仔鼠的睪丸，對睪丸進行冰凍切片及酶學染色，計算睪丸的體積、胎兒型Leydig細胞的數(shù)目、細胞大小、胎兒型Leydi

3、g細胞的聚集情況;用放射免疫技術檢測胎兒睪丸中的睪酮水平;應用實時定量PCR(qPCR)技術，檢測胎兒型Leydig細胞相關基因[胰島素樣因子3(Ins13)、促黃體生成素受體（Lhcgr）、低密度膽固醇受體(Scarb1)，急性膽固醇合成調(diào)節(jié)蛋白(Star)、膽固醇側(cè)鏈裂解酶(Cyp11a1)、17α-羥化酶/17，20裂解酶(Cyp17a1)、3β-羥基類固醇脫氫酶1(Hsd3b1)和17β-羥基類固醇脫氫酶3(Hsd17b3)]的

4、表達情況;通過對睪丸的組織芯片結(jié)合半定量免疫組化染色，對胎兒型Leydig細胞相關蛋白(INSL3、CYP11A1和HSD3B1)的表達進行檢測。
　　結(jié)果：
　　DINP灌胃后可以顯著降低仔鼠體重;DINP對胎兒型Leydig細胞聚集的最低可見有害作用劑量水平(LOAEL)為10mg/kg，并劑量依賴地引起了胎兒型Leydig細胞聚集;造成大鼠胎兒睪丸中精原細胞多核化，DINP的LOAEL為100 mg/kg;10 mg/