Sideroflexin家族基因在非洲爪蟾胚胎中的表達(dá)與功能研究.pdf

1、在分離篩選新的胰腺標(biāo)記基因和發(fā)育調(diào)控基因的過程中，我們獲得了一個新的胰腺特異性表達(dá)的基因，siderofJexin2。該基因所屬的siderflexin家族共有5個成員。從其一級結(jié)構(gòu)分析，該家族是線粒體三羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白大家族中的一個新家族，它們共同隸屬于線粒體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白超家族，在人類中該超家族蛋白是由SLC25基因編碼的。這類蛋白一般位于線粒體內(nèi)膜中，為線粒體和細(xì)胞質(zhì)之間的物質(zhì)交換提供選擇性的通道，因此，它們在真核細(xì)胞的中間代謝中發(fā)揮著極為

2、重要的作用。除此之外，新近的研究表明這類蛋白中的成員SLC25A38在斑馬魚胚胎中參與紅血球生成。
　　 Sideroflexin(sfxn)的命名源于彎尾突變小鼠出現(xiàn)的彎尾(flexed tail)和siderocytic貧血表型，這兩種表型被認(rèn)為是由于sfxn1基因的移碼突變造成的。隨后的研究顯示另外一個基因Madh5的突變直接導(dǎo)致了彎尾小鼠出現(xiàn)急性貧血，而對sfxnl突變造成貧血的表型產(chǎn)生了懷疑?？傊壳盀橹?，sider

3、oflexin在代謝和發(fā)育中是否起作用，怎樣起作用，均屬未知。甚至在胚胎發(fā)育期間的表達(dá)，在任何模式動物中均未見報道。因此，我們系統(tǒng)地克隆了非洲爪蟾sideroflexin家族的五個基因，在分析其在胚胎發(fā)育過程中的表達(dá)的基礎(chǔ)上作了初步的功能分析。
　　 RT-PCR結(jié)果表明5個成員的mRNA都是母本表達(dá)的，在受精前的卵細(xì)胞中已有表達(dá)，而后經(jīng)歷了一個表達(dá)逐步增強(qiáng)的過程。整體原位雜交結(jié)果顯示除了在肝臟中的短暫表達(dá)之外，siderofl

4、exin2的表達(dá)只局限在胰腺中，因其表達(dá)比大部分已知的胰腺外分泌酶早，在背部和腹部胰腺原基融合之前即出現(xiàn)，因此是少有的背部胰腺和腹部胰腺融合之前的特異性標(biāo)記分子。序列分析表明sideroflexinl與sideroflexin3的同源程度最高，它們在胚胎的早期發(fā)生中的表達(dá)呈現(xiàn)出部分互補(bǔ)、部分重疊的模式。二者在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的表達(dá)非常相似。原腎中sideroflexinl--直表達(dá)在近端小管中，而sideroflexin3剛開始表達(dá)在遠(yuǎn)端小

5、管和導(dǎo)管中，之后在近端小管、遠(yuǎn)端小管和導(dǎo)管中都有表達(dá)。有所不同的是sideroflexinl在胚胎發(fā)育的后期在肝臟和胰腺中也有很清晰的表達(dá)。Sideroflexin4與5只有微弱的信號在較晚期的胚胎腦部被檢測到?？傊@5個sideroflexin基因在非洲爪蟾胚胎中的表達(dá)既有互相重疊的地方，也有各自的特性。通過mRNA注射進(jìn)行基因過表達(dá)和通過morpholino注射進(jìn)行基因敲低的結(jié)果顯示，只有sideroflexin3的morphol