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文檔簡介
1、毛囊作為皮膚的衍生物,是產(chǎn)生被毛的重要組織,它的性狀及組織結構決定著動物被毛的品質和產(chǎn)量。近年來的研究揭示,Eph家族基因在動物皮膚的毛囊發(fā)育中具有十分重要的作用,可能參與了毛囊的形成過程。本研究以敖漢細毛羊不同時期皮膚為材料,采用組織學、實時熒光定量PCR及免疫組織化學等技術,對EphA2及其配體Ephrin A2基因和EphA4及其配體Ephrin A3基因在皮膚毛囊中mRNA水平、蛋白水平的表達規(guī)律進行研究,以探究Eph家族基因在
2、毛囊形態(tài)發(fā)生、發(fā)育過程中的表達水平與分布規(guī)律,為細毛羊毛囊發(fā)育的分子調控機制提供理論基礎。
研究結果如下:
1.皮膚組織結構研究顯示,毛囊結構包括結締組織鞘、外根鞘、內(nèi)根鞘、毛干和毛球部。在胎齡90 d時,體側部發(fā)現(xiàn)初級毛囊及次級毛囊毛芽。在胎齡120 d時,毛囊發(fā)生角質化,形成角質化毛干,毛干穿出體表,再分化次級毛囊發(fā)生。出生后一個月時,穿出體表毛干進一步增多。敖漢細毛羊腹股溝部皮膚毛囊密度很低,未見再分化次級毛囊
3、和豎毛肌,但皮脂腺、汗腺較發(fā)達。與胎齡120 d時相比,出生后一個月時的毛囊纖維直徑顯著增大(P<0.05)。初級毛囊密度,在胎齡120 d時顯著低于胎齡90 d時(P<0.01),出生后1 d時顯著低于胎齡120 d時(P<0.05)。次級毛囊密度,在胎齡120 d時顯著高于胎齡90 d時(P<0.01),出生后1 d時顯著低于胎齡120 d時(P<0.01);出生后一個月時和出生后1 d時差異不顯著(P>0.05)。
2.
4、實時熒光定量PCR結果顯示:EphA2基因和Ephrin A2基因mRNA相對表達量:在胎齡120 d時都顯著高于胎齡90 d時(P<0.01),出生后1 d時顯著低于胎齡120 d時(P<0.01),出生后一個月時和出生后1 d時差異不顯著(P>0.05)。
EphA4基因 mRNA相對表達量:胎齡90 d時與胎齡120d時差異不顯著(P>0.05),出生后1 d時顯著低于胎齡120 d時(P<0.01),出生后一個月時顯著
5、高于出生后1 d時(P<0.01)。
Ephrin A3基因 mRNA相對表達量:胎齡120 d時顯著高于胎齡90 d時(P<0.01),出生后1 d時顯著低于胎齡120 d時(P<0.01),出生后一個月時和出生后1 d時差異不顯著(P>0.05)。
3.免疫組化試驗結果顯示:EphA2、Ephrin A2、EphA4和Ephrin A3蛋白在胎齡90 d、胎齡120 d、出生后1 d和出生后一個月,4個時期的敖漢
6、細毛羊體側部皮膚中均呈現(xiàn)時空特異性的表達。
上述結果表明:在胎齡90 d以前初級毛囊已經(jīng)發(fā)生,出生后一個月時,仍有部分毛囊毛纖維未穿出體表。敖漢細毛羊腹股溝部皮膚與體側部皮膚相比,毛囊密度很低,但皮脂腺、汗腺較發(fā)達。
在胎齡120 d次級毛囊再分化大量發(fā)生時,EphA2、Ephrin A2和Ephrin A3基因的表達量同時顯著升高,推測它們在次級毛囊的再分化過程中可能具有重要作用。此時,發(fā)現(xiàn) EphA4基因在毛乳頭
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