Eph家族基因在細(xì)毛羊皮膚中的表達(dá)研究.pdf

1、毛囊作為皮膚的衍生物，是產(chǎn)生被毛的重要組織，它的性狀及組織結(jié)構(gòu)決定著動(dòng)物被毛的品質(zhì)和產(chǎn)量。近年來(lái)的研究揭示，Eph家族基因在動(dòng)物皮膚的毛囊發(fā)育中具有十分重要的作用，可能參與了毛囊的形成過(guò)程。本研究以敖漢細(xì)毛羊不同時(shí)期皮膚為材料，采用組織學(xué)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR及免疫組織化學(xué)等技術(shù)，對(duì)EphA2及其配體Ephrin A2基因和EphA4及其配體Ephrin A3基因在皮膚毛囊中mRNA水平、蛋白水平的表達(dá)規(guī)律進(jìn)行研究，以探究Eph家族基因在

2、毛囊形態(tài)發(fā)生、發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)水平與分布規(guī)律，為細(xì)毛羊毛囊發(fā)育的分子調(diào)控機(jī)制提供理論基礎(chǔ)。
　　研究結(jié)果如下：
　　1.皮膚組織結(jié)構(gòu)研究顯示，毛囊結(jié)構(gòu)包括結(jié)締組織鞘、外根鞘、內(nèi)根鞘、毛干和毛球部。在胎齡90 d時(shí)，體側(cè)部發(fā)現(xiàn)初級(jí)毛囊及次級(jí)毛囊毛芽。在胎齡120 d時(shí)，毛囊發(fā)生角質(zhì)化，形成角質(zhì)化毛干，毛干穿出體表，再分化次級(jí)毛囊發(fā)生。出生后一個(gè)月時(shí)，穿出體表毛干進(jìn)一步增多。敖漢細(xì)毛羊腹股溝部皮膚毛囊密度很低，未見(jiàn)再分化次級(jí)毛囊

3、和豎毛肌，但皮脂腺、汗腺較發(fā)達(dá)。與胎齡120 d時(shí)相比，出生后一個(gè)月時(shí)的毛囊纖維直徑顯著增大（P<0.05）。初級(jí)毛囊密度，在胎齡120 d時(shí)顯著低于胎齡90 d時(shí)（P<0.01），出生后1 d時(shí)顯著低于胎齡120 d時(shí)（P<0.05）。次級(jí)毛囊密度，在胎齡120 d時(shí)顯著高于胎齡90 d時(shí)（P<0.01），出生后1 d時(shí)顯著低于胎齡120 d時(shí)（P<0.01）；出生后一個(gè)月時(shí)和出生后1 d時(shí)差異不顯著（P>0.05）。
　　2.

4、實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示：EphA2基因和Ephrin A2基因mRNA相對(duì)表達(dá)量：在胎齡120 d時(shí)都顯著高于胎齡90 d時(shí)（P<0.01），出生后1 d時(shí)顯著低于胎齡120 d時(shí)（P<0.01），出生后一個(gè)月時(shí)和出生后1 d時(shí)差異不顯著（P>0.05）。
　　EphA4基因 mRNA相對(duì)表達(dá)量：胎齡90 d時(shí)與胎齡120d時(shí)差異不顯著（P>0.05），出生后1 d時(shí)顯著低于胎齡120 d時(shí)（P<0.01），出生后一個(gè)月時(shí)顯著

5、高于出生后1 d時(shí)（P<0.01）。
　　Ephrin A3基因 mRNA相對(duì)表達(dá)量：胎齡120 d時(shí)顯著高于胎齡90 d時(shí)（P<0.01），出生后1 d時(shí)顯著低于胎齡120 d時(shí)（P<0.01），出生后一個(gè)月時(shí)和出生后1 d時(shí)差異不顯著（P>0.05）。
　　3.免疫組化試驗(yàn)結(jié)果顯示：EphA2、Ephrin A2、EphA4和Ephrin A3蛋白在胎齡90 d、胎齡120 d、出生后1 d和出生后一個(gè)月，4個(gè)時(shí)期的敖漢

6、細(xì)毛羊體側(cè)部皮膚中均呈現(xiàn)時(shí)空特異性的表達(dá)。
　　上述結(jié)果表明：在胎齡90 d以前初級(jí)毛囊已經(jīng)發(fā)生，出生后一個(gè)月時(shí)，仍有部分毛囊毛纖維未穿出體表。敖漢細(xì)毛羊腹股溝部皮膚與體側(cè)部皮膚相比，毛囊密度很低，但皮脂腺、汗腺較發(fā)達(dá)。
　　在胎齡120 d次級(jí)毛囊再分化大量發(fā)生時(shí)，EphA2、Ephrin A2和Ephrin A3基因的表達(dá)量同時(shí)顯著升高，推測(cè)它們?cè)诖渭?jí)毛囊的再分化過(guò)程中可能具有重要作用。此時(shí)，發(fā)現(xiàn) EphA4基因在毛乳頭