外源基因在雞早期胚胎內(nèi)整合及表達(dá)的研究.pdf

1、該研究以LacZ基因?yàn)閳?bào)告基因,構(gòu)建了兩種載體質(zhì)粒:p-CMV-β-Gal和p-OV-β-Gal,分別利用顯微注射法和精子介導(dǎo)法將這兩種載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)移到雞早期胚胎內(nèi),對(duì)外源基因的整合及表達(dá)情況進(jìn)行檢測分析.同時(shí),對(duì)添加抗菌素溶液是否有利于雞胚的正常發(fā)育進(jìn)行了探討.結(jié)果如下:1、在處理過的受精蛋中添加一定量的抗菌素(青、鏈霉素)溶液對(duì)于提高雞胚抵御外部環(huán)境污染能力、避免雞胚早期死亡的效果并不顯著,但在實(shí)際試驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)添加的抗菌素溶液能起到

2、補(bǔ)充水分的作用,保證雞胚的正常發(fā)育.2、利用顯微注射法轉(zhuǎn)移載體質(zhì)粒(p-CMV-β-Gal)的過程破壞了受精蛋的結(jié)構(gòu),對(duì)雞胚的發(fā)育造成影響,表現(xiàn)在雞胚在早期孵化階段大批死亡,死亡率高達(dá)58.07％(367/632),但這種方法能夠?qū)⑤d體質(zhì)粒轉(zhuǎn)移到雞早期胚胎內(nèi),外源基因整合陽性率為21.43％(15/70),在部分雞胚中能檢測到外源基因的表達(dá),陽性率為9.52％(4/42).3、利用精子介導(dǎo)法能將載體質(zhì)粒(p-OV-β-Gal)轉(zhuǎn)移到雞早