黃芩苷對癲癇模型大鼠行為學及對腦組織中 HMGB1-NF-κB表達的影響.pdf

1、 第一部分 HMGB1、NF-κB在癲癇點燃大鼠腦組織中的表達
目的：研究 HMGB1、NF-κB在氯化鋰-匹羅卡品誘導的顳葉癲癇大鼠模型海馬組織中表達的變化。方法：1. 成年雄性 SD 大鼠,隨機分為空白對照組與模型組(亞組：24h 、72h、1w, 2w,1m,2m。各組 n=5),經腹腔給予氯化鋰-匹羅卡品注射,構建顳葉癲癇模型。2. 運用免疫熒光雙標和免疫印跡研究HMGB1和NF-κB在癲癇大鼠腦組織中的表達。結

2、果：1.免疫印跡顯示,HMGB1 在癲癇大鼠海馬組織勻漿中表達較空白對照組升高,平均光密度值差異具有統(tǒng)計學意義,P<0.05；免疫熒光顯示,HMGB1主要分布在癲癇大鼠神經元,在神經膠質細胞少量分布。2.免疫熒光顯示,與空白對照組比較,NF-κB在癲癇大鼠腦組織中主要分布于細胞核。
結論：在顳葉癲癇(Temporal lobe epilepsy,TLE)大鼠模型中, 大鼠癇性發(fā)作后引起 HMGB1 表達增高、NF-κB 活

3、化增強,提示 HMGB1 和NF-κB參與了癲癇的發(fā)生。
第二部分 黃芩苷干預對癲癇大鼠的行為學以及對HMGB1、NF-κB表達的影響
目的：通過觀察黃芩苷干預組與模型組大鼠癲癇發(fā)作潛伏期及發(fā)作級別,了解黃芩苷對大鼠癇性發(fā)作的影響,檢測 HMGB1、NF-κB 的表達,推測黃芩苷影響大鼠癲癇發(fā)生的潛在機制。方法：1.行為學觀察：成年雄性 SD 大鼠,隨機分為模型組、黃芩苷低劑量干預組、黃芩苷高劑量干預組(各組

4、n=8)；在給予匹羅卡品造模前30min,分別給予大鼠黃芩苷低劑量100mg/kg和高劑量200mg/kg腹腔注射,觀察癲癇大鼠行為學改變。2. 在海人酸單側側腦室注射和氯化鋰-匹羅卡品腹腔注射,建立的顳葉癲癇大鼠模型中,運用免疫印跡對比模型組、黃芩苷干預組(亞組：6h,24h 、72h、1w。各組 n=5)中 HMGB1 在癲癇大鼠腦組織中的表達。在氯化鋰-匹羅卡品介導的顳葉癲癇大鼠模型中,運用免疫組化對比研究HMGB1在癲癇大鼠腦組

5、織切片中的陽性細胞數(shù)。氯化鋰-匹羅卡品介導的顳葉癲癇大鼠模型中,運用免疫印跡和免疫熒光對比研究NF-κB在癲癇大鼠腦組織中的活化情況。結果：1. 與模型組對比,黃芩苷干預組中出現(xiàn) RacineⅣ-Ⅴ級癲癇發(fā)作大鼠的潛伏期明顯延長,且組間有明顯改變,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；匹羅卡品腹腔注射后,60 分鐘觀察期內黃芩苷干預組癲癇大鼠發(fā)作級別較模型組降低。2. 在海人酸單側側腦室注射和氯化鋰-匹羅卡品腹腔注射的顳葉癲癇大鼠模型中,免

6、疫印跡顯示黃芩苷干預后,HMGB1在各時間點癲癇大鼠海馬組織勻漿中表達較模型組降低,組間平均光密度值差異具有統(tǒng)計學意義,P<0.05；在氯化鋰-匹羅卡品介導的顳葉癲癇大鼠模型中,免疫組化結果顯示黃芩苷干預后HMGB1在癲癇大鼠腦組織切片中的陽性細胞數(shù)較模型組減少,差異具有統(tǒng)計學意義,P<0.05。3. 在氯化鋰-匹羅卡品介導的顳葉癲癇大鼠模型中,免疫印跡顯示黃芩苷干預后, NF-κB在癲癇大鼠海馬細胞核提取物中的表達較模型組降低,平均光