前列腺癌組織中TMPRSS2基因與ETS家族基因的多種融合亞型及意義.pdf

1、目的： 了解前列腺癌患者組織中TMPRSS2基因與ETS家族基因ERG、ETV1、ETV4之間的融合情況及意義。 方法： 1、根據(jù)Genbank中的TMPRSS2(NM_005656.2)、ERG(NM_004449.3)、ETV1(NM_004956.3)、ETV4(NM_001986.2)序列，在TMPRSS2基因上設(shè)計上游內(nèi)、外引物各一條，并分別在ERG、ETV1、ETV4等每個基因上設(shè)計下游內(nèi)、外引物各一

2、條，運用巢式RT-PCR對前列腺癌患者組織及良性增生組織的TMPRSS2基因與ERG、ETV1、ETV4基因之間融合所產(chǎn)生的TMPRSS2/ERG、TMPRSS2/ETV1、TMPRSS2/ETV4融合體進行檢測。 2、巢式RT-PCR產(chǎn)物經(jīng)1.5％瓊脂糖凝膠電泳，結(jié)果陽性者，純化PCR產(chǎn)物進行直接測序；用BLAST在線工具軟件對測序結(jié)果與參考序列進行比對并確定融合位點。 3、分析融合基因與前列腺癌組織Gleason分級

3、關(guān)系。 4、本研究的臨床病例包括前列腺癌(PCa)組32例，年齡60～94歲，平均74±7.6歲。Gleason評分5～7分15例，8～10分17例。前列腺良性增生(BPH)組34例，年齡51～83歲，平均69±7.9歲。前列腺組織在直腸超聲波(TRUS)引導下6點穿刺。標本分兩份，一份送組織病理學檢查，另一份取組織立即放入液氮中保存。臨床診斷均經(jīng)病理組織學證實。 結(jié)果： 1、前列腺癌患者組織標本中檢測到TMPR

4、SS2基因與ERG、ETV1基因之間融合所產(chǎn)生的TMPRSS2/ERG和TMPRSS2/ETV1融合基因，陽性率分別為53.1％(17/32例)和6.3％(2/32例)，未檢到TMPRSS2/ETV4融合基因，34例前列腺良性增生組織標本中均未檢到TMPRSS2/ERG、TMPRSS2/ETV1和TMPRSS2/ETV4融合基因。 2、發(fā)現(xiàn)TMPRSS2/ERG融合基因存在至少5種不同亞型，其中1種為新發(fā)現(xiàn)融合基因亞型(Genb

5、ank登錄號：EU090248)；TMPRSS2/ETV1融合基因為1種融合型，為新發(fā)現(xiàn)融合基因亞型(Genbank登錄號：EU090249)；同一標本只能檢出TMPRSS2/ERG融合基因或TMPRSS2/ETV1融合基因陽性，但單一標本中可存在到多種TMPRSS2/ERG融合基因亞型。 3、融合基因陰性組與陽性組Gleason評分無統(tǒng)計學差異(P=0.187)。 結(jié)論： 前列腺癌組織中存在存在TMPRSS2/