以牛初乳為原料制備免疫調節(jié)乳制品.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、蛋白質中含有許多活性成分,通過酶解或其他手段可釋放出來。以牛初乳為原料,分離酪蛋白、乳清蛋白及乳鐵蛋白等主要成分,分別水解,檢測水解物的免疫刺激指數,以刺激指數為指標確定水解條件,并將水解物與乳粉按比例混合,形成配方奶粉。實驗過程中,將乳清蛋白、酪蛋白在濃度分別為2%、4%、6%、8%,酶與底物比分別為1:30、1:60、1:90的條件下用胰蛋白酶水解。乳鐵蛋白在濃度分別為2%、4%、6%,酶與底物比分別為1:30、1:60、1:90的

2、條件下用胃蛋白酶進行水解。采用MTT法分別以濃度為10μg/ml、100μg/ml、1000μg/ml的乳清蛋白、酪蛋白、乳鐵蛋白以及三種蛋白的水解產物對脾淋巴細胞的免疫刺激作用進行檢測,結果表明:三種濃度下的水解產物對脾淋巴細胞的免疫刺激指數SI值明顯高于三種蛋白本身SI值。酪蛋白對脾淋巴細胞的SI值最高為2.53,酪蛋白水解產物在底物濃度6%,酶與底物比為1:30,1000μg/ml條件下SI值最高,為5.83;乳清蛋白對脾淋巴細胞

3、的SI最高值為:2.05,乳清蛋白水解產物在底物濃度8%,酶與底物比為1:30,1000μg/ml時SI值最高,為4.89;乳鐵蛋白對脾淋巴細胞的SI值最高為2.29,乳鐵蛋白水解產物在底物濃度6%,酶與底物比為1:30,1000μg/ml時SI值最高,為5.33。以免疫刺激指數作為指標,選擇以上三個條件為最優(yōu)水解條件。 將得到的最優(yōu)水解條件的產物與乳粉按以下比例混合做成乳品配方,在10mg/ml,100mg/ml濃度下進行免疫

4、檢測: (1)奶粉與乳鐵蛋白水解產物,酪蛋白水解產物,乳清蛋白水解產物分別按100g:1g混合,均在100mg/ml濃度下SI最高,分別為5.20,5.70,4.77; (2)依牛奶中三種蛋白比例成分添加水解產物,即酪蛋白水解產物:乳清蛋白水解產物:乳鐵蛋白水解產物為80%:19.5%:0.5%,添加蛋白水解產物的總量為6g,在100mg/ml濃度下SI最高,為3.90; (3)將嬰幼兒和中老年奶粉中分別添加6g

5、酪蛋白水解產物,均在100mg/ml濃度下SI最高,分別為4.30和4.50; (4)嬰幼兒奶粉和中老年奶粉,均在100mg/ml濃度下SI最高,為2.40和2.64; (5)嬰幼兒和中老年奶粉中分別摻入輔料,均在100mg/ml時SI最高,分別為2.39和2.47 (6)將(2)與(5)混合,進行免疫檢測,嬰幼兒配方和中老年配方均在100mg/ml時SI最高,分別為6.10和5.49; (7)固定乳鐵蛋

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