重組抗IgE人源化單克隆抗體藥效學(xué)及藥代動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、哮喘是當(dāng)今世界威脅公共健康最主要的慢性肺部疾病，其發(fā)病率和死亡率均呈逐年上升趨勢。目前，吸入糖皮質(zhì)激素與長效β2受體激動(dòng)劑的復(fù)合制劑是中重度持續(xù)性哮喘的首選療法，但是臨床上仍有部分中到重度難治性哮喘患者癥狀不能很好控制。哮喘發(fā)病機(jī)制研究提示，血清中IgE水平的增高是哮喘的主要特點(diǎn)，也是引起哮喘發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。機(jī)體再次接觸同種過敏原時(shí)，過敏原可與致敏的肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面的IgE交聯(lián)，通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，使肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞釋

2、放組胺、白三烯、前列腺素等炎癥介質(zhì)，從而導(dǎo)致平滑肌收縮、黏液分泌增加、血管通透性增高和炎性細(xì)胞浸潤，引發(fā)哮喘癥狀。鑒于IgE在哮喘發(fā)病中的重要作用，如何降低哮喘患者體內(nèi)的IgE水平成為哮喘防治的研究重點(diǎn)之一。重組抗IgE人源化單克隆抗體奧瑪珠單抗(omalizumab)能與IgE分子Fc片段的Cε3結(jié)合，該區(qū)域也是IgE分子與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面的IgE受體(FcεRI)的結(jié)合位點(diǎn)。因此，omalizumab能抑制IgE與FcεR

3、I的結(jié)合，從而限制炎癥介質(zhì)的釋放。2002年6月，omalizumab在澳大利亞首次獲批用于治療成人和青少年中度的過每性哮喘以來，目前已在包括美國和歐盟在內(nèi)的全球30多個(gè)國家使用。然而在中國，omalizumab尚未獲準(zhǔn)進(jìn)入國內(nèi)銷售，其臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行。
　　 重組抗IgE人源化單克隆抗體CMAB007由抗體藥物國家工程研究中心自主研發(fā)，其氨基酸序列與omalizumab相同，理論上推斷CMAB007和omalizumab應(yīng)有相

4、似的體內(nèi)外藥效和藥代動(dòng)力學(xué)特征。本課題以CMAB007為研究藥物，進(jìn)行體外藥效學(xué)研究和健康受試者體內(nèi)單次及多次皮下給藥的藥代動(dòng)力學(xué)-藥效學(xué)研究。
　　 本課題體外藥效學(xué)研究結(jié)果表明：CMAB007可抑制IgE與可溶性及細(xì)胞表面FcεRI結(jié)合，其抑制程度與omalizumab相似。CMAB007塒結(jié)合于細(xì)胞表面FcεRI的IgE則無影響，因此不會(huì)導(dǎo)致體內(nèi)已斂敏靶細(xì)胞的IgE交聯(lián)及脫顆粒。另外，CMAB007還可以抑制IgE與細(xì)胞表

5、面FcεRI結(jié)合導(dǎo)致的脫顆粒反應(yīng)，抑制程度與omalizumab相似。
　　 本課題利用自行構(gòu)建和表達(dá)的FcεRIα-Fc融合蛋白，建立血清CMAB007濃度FLISA檢測方法，經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果顯示該檢測方法的最低定量限為0.1μg/mL，在0.1-10μg/ml，范圍內(nèi)重現(xiàn)性良好，平均回收率大于90％，符合CMAB007的藥代動(dòng)力學(xué)研究的要求。
　　 在體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)-藥效學(xué)研究中，27名健康受試者平均分配至150mg

6、、300mg和600mg三個(gè)劑量組(n=9)，分別接受單次CMAB007皮下注射；9名健康受試者分配至150mg(n=4)和300mg(n=5)兩個(gè)劑量組，分別接受多次CMAB007皮下注射，給藥頻率為每4周1次，共6次。在單次給藥試驗(yàn)中，CMAB007在研究劑量范圍內(nèi)呈線性藥代動(dòng)力學(xué)規(guī)律，血清藥物峰濃度Cmax和藥物濃度-時(shí)間曲線下面積與劑量呈線性相關(guān)。各組受試者皮下給予CMAB007后6-8天血藥濃度達(dá)到峰值，藥物半衰期約為25天，

7、與體內(nèi)IgG相一致。在多次給藥試驗(yàn)中，第3次給藥后血清藥物濃度達(dá)到穩(wěn)態(tài)，穩(wěn)態(tài)時(shí)平均最高血藥濃度(Css-max)和藥物濃度-時(shí)間曲線下面積(AUCτ)與劑量亦呈線性相關(guān)。單次給予150mg、300mg和600mgCMAB007后，受試者體內(nèi)血清游離IgE濃度呈劑量相關(guān)性降低，降低程度為基線期的91.9-98.8%?？侷gE(游離IgE和CMAB007：IgE復(fù)合物)呈CMAB007劑量相關(guān)性升高。
　　 本課題研究結(jié)果證實(shí)CMA