鞘內(nèi)注射CatS抑制劑LHVS緩解大鼠骨癌痛.pdf

1、第一部分：鞘內(nèi)注射CatS抑制劑LHVS對(duì)骨癌痛大鼠機(jī)械性痛閾的影響
　　目的：探討半胱氨酸組織蛋白酶S（Cathepsin S，CatS）抑制劑嗎啉亮氨酸高苯丙氨酸乙烯基苯基砜（morpholinurea-leucine-homophenylalanine-vinyl phenyl sulfone，LHVS）對(duì)骨癌痛大鼠機(jī)械性痛閾的影響及可能的脊髓機(jī)制。
　　方法：雌性未交配SD大鼠50只，體重180～220g，采用隨機(jī)數(shù)

2、字表法將大鼠分為5組，每組10只：假手術(shù)組（S組）、骨癌痛組（BP組）、假手術(shù)+LHVS組（S+L組）、骨癌痛組+二甲基亞礬（DMSO）組（BP+D組）、骨癌痛+LHVS組（BP+L組）。大鼠左側(cè)脛骨骨髓腔內(nèi)接種乳腺癌腫瘤細(xì)胞Walker256建立骨癌痛模型，以Hank液代替Walker256建立假手術(shù)模型。造模前1天（基礎(chǔ)值）及造模后第3、6、9、10、11、12天（T0～6）測(cè)定大鼠機(jī)械性縮爪閾值（MWT）。造模后第10～12天，S

3、+L組、BP+L組分別鞘內(nèi)注射LHVS50nmol/10μl，BP+D組鞘內(nèi)注射5%DMSO10μl，分別于給藥前及給藥后第0.5、1、3、6、9、12、24小時(shí)（t0～7）測(cè)定左后肢機(jī)械性縮足反射閾值（MWT）。第12天給藥后處死大鼠，免疫組化法測(cè)定L4～6左側(cè)脊髓背角OX-42表達(dá)情況。
　　結(jié)果：與S組及S+L組比較，BP組及 BP+D組大鼠T2～6時(shí)點(diǎn)MWT下降（P<0.01）， T6時(shí)點(diǎn)脊髓背角OX-42陽性細(xì)胞數(shù)和平均

4、光密度值（MOD）增加（P<0.01）；與BP組及BP+D組比較，BP+L組大鼠T4～6時(shí)點(diǎn)MWT升高（P<0.05），并在t4時(shí)點(diǎn)達(dá)高峰（P<0.01），可持續(xù)至t6時(shí)點(diǎn)（P>0.05），T6時(shí)點(diǎn)脊髓背角OX-42陽性細(xì)胞數(shù)和平均光密度值（MOD）下降（P<0.01）；S組和S+L組上述統(tǒng)計(jì)學(xué)指標(biāo)無差異（P>0.05）。
　　結(jié)論：鞘內(nèi)注射LHVS可抑制骨癌痛大鼠脊髓背角OX-42的表達(dá)并減輕骨癌痛， CatS可能在骨癌痛的產(chǎn)生

5、和維持中起作用。
　　第二部分：鞘內(nèi)注射CatS抑制劑LHVS對(duì)骨癌痛大鼠脊髓背角CatS、FKN表達(dá)及腦脊液FKN含量的影響
　　目的：觀察鞘內(nèi)注射CatS抑制劑LHVS后，骨癌痛大鼠脊髓背角CatS、FKN表達(dá)及腦脊液FKN含量變化，并探討其可能機(jī)制。
　　方法：雌性未交配SD大鼠50只，體重180～220g，采用隨機(jī)數(shù)字表法將大鼠分為5組，每組10只：假手術(shù)組（S組）、骨癌痛組（BP組）、假手術(shù)+LHVS組（S+

6、L組）、骨癌痛組+二甲基亞礬（DMSO）組（BP+D組）、骨癌痛+LHVS組（BP+L組）。大鼠左側(cè)脛骨骨髓腔內(nèi)接種乳腺癌腫瘤細(xì)胞Walker256建立骨癌痛模型，以Hank液代替 Walker256建立假手術(shù)模型。造模后第12天，S+L組、BP+L組分別鞘內(nèi)注射LHVS50nmol/10μl，BP+D組鞘內(nèi)注射5%DMSO10μl。給藥后取大鼠腦脊液，Elisa法測(cè)定大鼠腦脊液中FKN含量，免疫組化法測(cè)定L4～6左側(cè)脊髓背角CatS、

7、FKN表達(dá)情況。
　　結(jié)果：與S組比較，BP組及BP+D組脊髓背角CatS的MOD值明顯增加（P<0.01）， S+L組脊髓背角CatS的MOD值增加（P<0.05）；與BP組及BP+D組比較，BP+L組脊髓背角CatS的MOD值增加（P<0.01）；各組脊髓背角FKN的MOD無明顯差異（P>0.05）；與S組及S+L組比較，BP組及BP+D組腦脊液中FKN含量增加（P<0.01），與BP組及BP+D組比較，BP+L組腦脊液中FK