固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)酶及DL-色氨酸的拆分.pdf

1、該論文對米曲氨基酰化酶的拆分制備L-色氨酸進(jìn)行了優(yōu)化研究:包括固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)米曲酶的優(yōu)化研究,米曲氨基?；傅姆蛛x純化及其酶學(xué)性質(zhì)研究,以及氨基?；傅墓潭ɑ芯?對于固態(tài)發(fā)酵制備氨基?；?對制曲條件和固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基的組成進(jìn)行了研究:最佳發(fā)酵培養(yǎng)基組成基質(zhì)原料比為8:2,水活度為0.7,最佳產(chǎn)酶時間為48h.添加誘導(dǎo)物基本上沒有作用.復(fù)合促進(jìn)劑中吐溫-80和植酸同時存在時米曲霉3042的激活作用大幅度提高.添加復(fù)合促進(jìn)劑后,固態(tài)發(fā)酵米曲霉

2、產(chǎn)氨基?；傅拿富钸_(dá)到最高值的時間為35-40h,可以比不加促進(jìn)劑的時間縮短了5-10h;且拆分N-乙酰-DL-色氨酸的酶活也提高171.94％.對米曲氨基酰化酶的純化研究,嘗試了硫酸銨鹽析分級沉淀、疏水層析、凝膠電泳等一系列粗分級和細(xì)分級的純化方法,并對米曲氨在?；傅拿笇W(xué)性質(zhì)進(jìn)行了探討.用硫酸銨分級沉淀,40％飽和度去除大部分雜蛋白,60％飽和度時沉淀下來的大部分是所需要的酶,鹽析純化倍數(shù)可達(dá)6倍.粗酶液經(jīng)疏水層析柱后,純化倍數(shù)可達(dá)

3、28倍.SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)測定氨基?；竵喕肿恿?凝膠電泳2條帶,第一條帶的分子量為55,200Da第二條帶的分子最為31,000Da.研究了氨基?；傅亩喾N包埋方法,嘗試了合成樹脂共價交聯(lián)法固定化米曲氨基?；?用不覆膜,單次覆膜和兩次覆膜的固定化酶進(jìn)行批次拆分實(shí)驗(yàn)比較,兩次覆膜改性海藻酸鈣凝膠包埋固定化氨基?；感Ч詈?能反應(yīng)20個批次.合成樹脂柔性鏈共價交聯(lián)固定化酶的實(shí)驗(yàn),柔性鏈越長固定化效果越好.