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1、目的:了解臨汾地區(qū)淋病奈瑟菌對環(huán)丙沙星的耐藥性及其與gyrA基因QRDR(喹諾酮類耐藥決定區(qū))之間的關(guān)系,為探索建立快速、有效的淋病奈瑟菌耐藥菌株基因檢測方法提供依據(jù)。 方法:采集33例臨汾地區(qū)淋病奈瑟菌感染病例標(biāo)本,通過分離、鑒定、純培養(yǎng),以及K-B紙片法藥物敏感試驗篩選出對環(huán)丙沙星耐藥菌株33株,設(shè)計對應(yīng)于淋球菌gyrA上QRDR區(qū)基因片段的引物,經(jīng)過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增其目的基因片段,并對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行DNA序列測定
2、,明確gyrA基因突變的情況。 結(jié)果: 33株淋病奈瑟菌臨床分離株對環(huán)丙沙星全部耐藥:所有耐藥菌株均經(jīng)PCR擴(kuò)增出大小為225bp(對應(yīng)于QRDR)的基因片段;測序結(jié)果顯示耐藥菌株都發(fā)生了91位點(diǎn)突變(Ser-91→Phe),其中單獨(dú)91位點(diǎn)突變的有3株,發(fā)生91和95雙位點(diǎn)突變的有30株,95位點(diǎn)突變類型有三種:Asp-95→Gly,Asp-95→Asn,Asp-95→Ala,以Asp-95→Gly最為常見,有19株,占gyr
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